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其實生化試劑標本要求方法

2021-5-11  閱讀(1448)

其實生化試劑注意事項:

1、樣品的濃度等指標是根據(jù)標準曲線計算出來的,所以先要把做標準曲線看作是比做正式實驗還要重要的件事,否則后面的實驗結(jié)果無從談起。
2、設(shè)置標準曲線樣品的標準濃度范圍要有個比較大的跨度,并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度,即樣品的濃度要在標準曲線濃度范圍之內(nèi),包括上限和下限。而對于呈S型的標準曲線,盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度zui陡段,即曲線幾乎成直線的范圍內(nèi)。
3、采用倍比稀釋法配制標準曲線中的標準樣品濃度,這樣就能夠保證標準樣品的濃度不會出現(xiàn)較大的偏離。
4、檢測標準樣品時,應按濃度遞增順序進行,以減少高濃度對低濃度的影響,提高準確性。
5、標準曲線的樣品數(shù)般為7個點,但至少要保證有5個點。
6、做出的標準曲線相關(guān)系數(shù)因?qū)嶒炓蟛煌兴儎?,但般來說,相關(guān)系數(shù)R至少要大于0.98,對于有些實驗,至少要0.99甚至是0.999。

其實生化試劑標本要求:

1. 血清:溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
2. 血漿:根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或其他作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
3. 尿液:無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑,用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后份待檢測,其余冷凍備用。標本的保存
般說來,在 5 天內(nèi)測定的標本可放置于 4℃,超過周測定的需低溫凍存。 對收集后當天進行檢測的標本,儲存在 4 ℃ 備用,如有特殊原因需要周期收集標本,將標本及時分裝后放在 -20 ℃ 或 -70 ℃ 條件下保存。避免反復凍融。標本 2 -8 ℃ 可保存 48 小時, -20 ℃ 可保存 1 個月。 -70 度可保存 6 個月。部分標 本也可加入適當防腐劑,激素類標本需添加。


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