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上海邦景實業(yè)有限公司
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人胚腎細胞實驗規(guī)則的幾點
2020-10-21 閱讀(448)
人胚腎細胞實驗規(guī)則：
1、要保證移液槍的準確性，誤差不能超過2%?？捎盟碗娮犹炱竭M行確定。但有專業(yè)人員進行矯正。
2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后，要更換槍頭。即使是吸取標準品時。
3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出，使各種人胚腎細胞都恢復到室溫，以使結(jié)果更穩(wěn)定。
4、實驗時，要使底物避光保存。
5、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。
6、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
7、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
8、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
9、應盡量做雙孔實驗，這樣才能保證數(shù)據(jù)的準確性。
10、對結(jié)果有疑問的樣品要用其它方法進行確證。
大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
大鼠骨堿性磷酸酶(BALP)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
大鼠膀胱腫瘤抗原(BTA)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
大鼠大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
大鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導蛋白(Bid)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
大鼠β羥丁酸(βOHB)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
大鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
大鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
大鼠β細胞素(BTC)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
人胚腎細胞注意事項：
（1）需要保存的血清必須儲存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月.由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂.
（2）瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻（小心勿造成氣泡）,使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生.切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀.
（3）熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已*解凍的人胚腎細胞.加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補體成分（complement）滅活.除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,而且還會影響血清的質(zhì)量.補體參與反應有:細胞毒作用, 平滑肌細胞收縮, 肥大細胞和血小板釋放組胺, 增強吞噬作用, 促進淋巴細胞和巨噬細胞發(fā)生化學趨化和活化.
（4）血清中的沉淀物 絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量.可用離心3000rpm, 5分鐘去除,也可不用處理. 顯微鏡下"小黑點":經(jīng)過熱處理過的血清,沉淀物的形成會顯著增多.有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點",常誤認為血清受污染.一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長,但如果懷疑血清質(zhì)量,則應立即停止使用,更換另一批號的血清.
（5）一般提供的血清為無菌,無需再過濾除菌.如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾,切勿直接過濾血清.
