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上海邦景實業(yè)有限公司
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雙位點HC-kit受體細(xì)胞株；DMF7說明書
2019-9-27 閱讀(280)
雖然寒霜降臨，可青松爺爺還穿著碧綠碧綠的長袍，顯得更加蒼翠。花園里，菊花爭芳斗艷，紅的如火，粉的似霞，白的像雪，美不勝收。柿子樹上的葉子全都落了，可黃澄澄的柿子還掛在枝頭，像一個個大大小小的橘黃燈籠，紅彤彤的海棠樹把樹枝都壓彎了。接下來介紹雙位點HC-kit受體細(xì)胞株；DMF7說明書
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
雙位點HC-kit受體細(xì)胞株；DMF7說明書細(xì)胞傳代培養(yǎng)
操作步驟
1、將長滿細(xì)胞的培養(yǎng)瓶中原來的培養(yǎng)液棄去。
2、加入0.5—1ml 0.25%溶液，使瓶底細(xì)胞都浸入溶液中。
3、瓶口塞好橡皮塞，放在倒置鏡下觀察細(xì)胞。隨著時間的推移，原貼壁的細(xì)胞逐漸趨于圓形，在還未漂起時將棄去，加入10ml培養(yǎng)液終止消化。 觀察消化也可以用肉眼，當(dāng)見到瓶底發(fā)白并出現(xiàn)細(xì)針孔空隙時終止消化。一般室溫消化時間約為1—3分鐘。
4、用吸管將貼壁的細(xì)胞吹打成懸液，分到另外兩到三瓶中，實踐培養(yǎng)液塞好橡皮塞，置37℃下繼續(xù)培養(yǎng)。第二天觀察貼壁生長情況。 附：消化液配制方法： 稱取0.25克蛋白酶（活力為1：250），加入100ml無Ca2+、Mg2+的Hank’s液溶解，濾器過濾除菌，4℃保存，用前可在37℃下回溫。
