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上海宇玫博生物科技有限公司
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更新時間:2017-12-02 15:22:28瀏覽次數(shù):289次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線Perfect SYBR Green Master Mix使用說明書
Item: V001
產品描述
是一種即用型的2×預混液,由BesTaq DNA熱啟動酶、SYBR GreenⅠ、dNTPs、Mg2+以及相關緩沖液組成,只需加入引物、模板和無菌水即可進行qPCR反應。
n 特異性高:熱啟動及優(yōu)化好的緩沖液可防止非
Perfect SYBR Green Master Mix使用說明書
Item: V001
產品描述
Perfect SYBR Green Master Mix是一種即用型的2×預混液,由BesTaq DNA熱啟動酶、SYBR GreenⅠ、dNTPs、Mg2+以及相關緩沖液組成,只需加入引物、模板和無菌水即可進行qPCR反應。
n 特異性高:熱啟動及優(yōu)化好的緩沖液可防止非特異性擴增和引物二聚體。
n 靈敏度好:可精確定量低至10拷貝的模板。
n 線性范圍廣:可精確定量9個數(shù)量級。
n 通用性好:cDNA、gDNA、質粒DNA、病毒DNA均可作為模板,并兼容所有的熒光PCR儀。
n 使用方便:實驗過程無需冰上操作。
儲存條件
-20℃保存12個月,使用前充分溶解混勻。
短期使用可放4℃保存,避免反復凍融。
注意事項
1. SYBR Green I 強光下易分解,使用時避免長時間強光照射本產品。
2. 本制品不含內參ROX染料。
使用方法
1. 反應液配制
反應液成分 | 體積 | 終濃度 |
12.5μl | 1× | |
正向引物(10μM) | 0.5μl | 200nM |
反向引物(10μM) | 0.5μl | 200nM |
模板* | 5μl | |
總計 | 補ddH2O至25μl |
*gDNA的模板用量不超過500ng,cDNA不超過50ng。
2. PCR循環(huán)條件的設定
步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) | |
1 | 預變性 | 95℃ | 5min | 1 cycle |
2 | 變性 | 95℃ | 10s | 40 cycles |
3 | 退火、延伸 | 60℃ | 45s | |
反應結束后應進行熔解曲線分析 |
3. 實驗結果分析
根據(jù)擴增曲線和熔解曲線的結果進行熒光定量PCR數(shù)據(jù)分析。
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