小鼠腫瘤壞死因子α（TNFα）酶聯(lián)免疫試劑盒【工作原理】
TNFα，腫瘤壞死因子α。TNFα前體是以跨膜蛋白的形式存在于細胞內(nèi)，在細胞外被剪切成17KDa的成熟形態(tài)（157個氨基酸）?；钚缘腡NFα以非共價鍵二聚體、三聚體甚至五聚體的形式存在，但在SDS-PAGE顯示為單一17KDa條帶。很多細胞都能合成TNFα，包括各種免疫細胞（單核細胞、巨噬細胞、T、B細胞、粒細胞、NK細胞）和非免疫細胞（上皮細胞、纖維細胞、肌細胞、Kuppfer細胞等）。TNFα的合成受到很多因素的影響。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒（ELISA）。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體，經(jīng)*（biotin）標記。樣品和*標記抗體先后加入酶標板孔反應(yīng)后，PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應(yīng)；經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。
【每套試劑盒中內(nèi)容】(96T)
小鼠腫瘤壞死因子α（TNFα）酶聯(lián)免疫試劑盒材料 數(shù)量
小鼠TNFα標準品 96T(2vial)
預(yù)包被小鼠TNFα抗體的96孔板 96T（8×12）
*標記小鼠TNFα抗體 96T (1:100)
ABC（親和素-過氧化物酶復(fù)合物） 96T (1:100)
樣品稀釋液 96T×2
小鼠TNFα抗體稀釋液 96T×1
ABC稀釋液 96T×1
TMB顯色液A 96T×1
TMB顯色液B 96T×1
TMB終止液 96T×1
ELISA洗滌液 96T×1(1:25)
小鼠腫瘤壞死因子α（TNFα）酶聯(lián)免疫試劑盒【需要而未提供的試劑和器材】
1． 37℃恒溫箱。
2． 標準規(guī)格酶標儀。
3． 自動洗板機。
4． 單通道或多通道可調(diào)節(jié)移液器以及其吸頭。
5． 蒸餾水，容量瓶等
6． 干凈的試管和Eppendof管。
小鼠腫瘤壞死因子α（TNFα）酶聯(lián)免疫試劑盒【注意事項】
1. 從-20℃取出的試劑盒，在4℃解凍過夜。盒內(nèi)每一瓶解凍的溶液在開啟瓶蓋之前都要輕輕搖勻，避免解凍時出現(xiàn)的分層，否則會出現(xiàn)濃度不均一的現(xiàn)象。
2. 開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。
3. 配制各種試劑時，切記混勻！
4. 用戶在初次使用試劑盒時，應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘，以便試劑集中到管底。
5. 建議所有小鼠TNFα標準品、樣本都做雙份檢測。
6. 要嚴格避免操作過程中酶標板干燥。干燥會使酶標板上生物成份迅速失活！
7. 為免交叉污染，要避免重復(fù)使用手中的吸頭和試管。
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