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上海莼試生物技術(shù)有限公司

進(jìn)口檢測(cè)試劑盒熒光素酶檢測(cè)技術(shù)實(shí)驗(yàn)流程

時(shí)間:2017-5-25閱讀:393
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進(jìn)口檢測(cè)試劑盒為取得測(cè)定效果,在用單管的熒光測(cè)定儀測(cè)定時(shí),樣品和測(cè)定試劑混合后到測(cè)定前的時(shí)間應(yīng)盡量控制在相同時(shí)間內(nèi),例如30秒內(nèi)。

由于溫度對(duì)酶反應(yīng)有影響,所以測(cè)定時(shí)樣品和試劑均需達(dá)到室溫后再進(jìn)行測(cè)定。

為保證熒光素酶檢測(cè)試劑的穩(wěn)定性,可以采取適當(dāng)分裝后避光保存的方法,以避免反復(fù)凍融和長(zhǎng)時(shí)間暴露于室溫。一般來(lái)說,如果不分裝使用三次(期間凍融三次),對(duì)測(cè)定結(jié)果無(wú)明顯影響。

進(jìn)口檢測(cè)試劑盒樣品和測(cè)定試劑混合后,必須等待1-2秒,再進(jìn)行測(cè)定。測(cè)定時(shí)間通常為10秒,根據(jù)情況也可以測(cè)定更長(zhǎng)或更短時(shí)間,但是同一批樣品使用相同的測(cè)定時(shí)間。

為避免由于質(zhì)粒轉(zhuǎn)細(xì)胞時(shí)效率的差異而帶來(lái)的誤差,可以同時(shí)轉(zhuǎn)入Renilla熒光素酶的報(bào)告基因質(zhì)粒作為內(nèi)參,采用雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒進(jìn)行檢測(cè);也可以同時(shí)轉(zhuǎn)入β-半乳糖甘酶報(bào)告基因質(zhì)粒作為內(nèi)參,然后采用β-半乳糖苷酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒進(jìn)行檢測(cè)。進(jìn)口檢測(cè)試劑盒采用熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒中的報(bào)告基因細(xì)胞裂解液裂解獲得的樣品,可以直接用于β-半乳糖苷酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒中的測(cè)定。

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