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上海仁捷生物科技有限公司

魚脂肪酸合成酶(FAS)ELISA試劑盒技術(shù)指導(dǎo)

時間:2017-8-25閱讀:134
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魚脂肪酸合成酶(FAS)ELISA試劑盒

英文名稱:Fish FAS ELISA Kit
實驗類型:夾心法
檢測范圍:75 U/L – 2400 U/L
zui低檢測限:10 U/L
應(yīng)用范圍:血清、血漿、組織勻漿、細胞培養(yǎng)物上清或其它相關(guān)液體(本產(chǎn)品僅供實驗室科研及非臨床用途)

魚脂肪酸合成酶(FAS)ELISA試劑盒僅供研究使用

 

魚脂肪酸合成酶(FAS)ELISA試劑盒實驗?zāi)康?/strong>

本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關(guān)液體樣本中魚脂肪酸合成酶(FAS)的含量。

有效期:6個月

保存條件:2-8℃

 

實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被魚脂肪酸合成酶(FAS)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的魚脂肪酸合成酶(FAS)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

 

魚脂肪酸合成酶(FAS)ELISA試劑盒組成

試劑盒組成96孔配置48孔配置備注
微孔酶標板8孔×12條8孔×6條 無
標準品0.3mL×6管0.3mL×6管
*6mL3mL
檢測抗體-HRP10mL5mL
20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進行稀釋
底物A6mL3mL
底物B6mL3mL
終止液6mL3mL
封板膜2張2張
說明書1份1份
自封袋1個1個

備注:

1. 標準品濃度依次為:2400、1200、600、300、150、0 U/L

2. 經(jīng)過大量正常標本檢驗,標本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi),實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可。當有部分樣本值超過zui大標準品濃度時,可用*將標本進行適當稀釋后再進行實驗。

操作步驟

1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。

6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

實驗結(jié)果計算

以所測標準品的OD值為橫坐標,標準品的濃度值為縱坐標,在坐標紙上或用相關(guān)軟件繪制標準曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計算出樣品的濃度。

(此圖僅供參考)

魚脂肪酸合成酶(FAS)ELISA試劑盒性能

1. 檢測范圍:75 U/L – 2400 U/L。

2. 靈敏度:zui低檢測濃度小于10 U/L。

3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

4. 重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% 。

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