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ELISA試劑盒各個操作步驟的留意關(guān)鍵

閱讀:169發(fā)布時間:2017-3-14

ELISA試劑盒各個操作步驟的留意關(guān)鍵

在運用前與室溫平衡,再進(jìn)行測定。在ELISA試劑盒中通常有兩次抗原抗體反響,即加標(biāo)本和加酶物后??乖贵w反響的完結(jié)需求有必定的溫度和時刻,這一保溫進(jìn)程稱為溫育(incubation),有人稱之為孵育,在ELISA試劑盒中似不恰當(dāng)。
ELISA試劑盒屬固相免疫測定,抗原、抗體的只在固相表面上發(fā)作。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標(biāo)本,其間的抗原并不是都有平等的和固相抗的時機(jī),只要zui靠近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體觸摸。
如果對試劑預(yù)備不太留意,在試驗時將試劑從冰箱中拿出來即用,而疏忽了這種做法有也許影響后邊溫育時刻不夠的疑問影響后邊的操作。測定中試劑的預(yù)備zui為要害的是,在試驗開始前,將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20min以上后,以使試劑盒       
2. 當(dāng)混合蛋白溶液時應(yīng)盡量輕緩,防止起泡。
3. 洗刷進(jìn)程非常重要,不充分的洗刷易形成假陽性。
4. 一次加樣時刻操控在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,引薦運用排槍加樣。
5. 請每次測定的一起做規(guī)范曲線,做復(fù)孔。
6. 如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定。
7. 在制造規(guī)范品、檢查溶液工作液時,請以相應(yīng)的稀釋液制造,ELISA試劑盒不能混雜。
8. 底物請避光保留。
9、ELISA試劑盒操控好每一步的操作時刻。


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