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液相色譜和古典液相色譜的比較

時(shí)間:2018/3/12閱讀:579
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夜宵液相色譜法時(shí)1964年-1965年開始發(fā)展起來的一項(xiàng)新穎快速的分離分析技術(shù)。它是經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上,引入氣相色譜的理論,在技術(shù)上采用了高壓、固定相和高靈敏度的檢測(cè)器,使之發(fā)展成為高分離速度、高分辨率、率、高檢測(cè)靈敏度的液相色譜法,也稱為現(xiàn)代液相色譜法。

古典液相色譜的致命弱點(diǎn)是柱效低、分離時(shí)間長(zhǎng),難以解決復(fù)雜混合物的分離,與氣相色譜比較有很大的差距。從色譜的速率林論知道,要提高柱效,就要把固定相的顆粒減小,同時(shí)要加快傳遞的速率:要縮短時(shí)間就要把流動(dòng)相的速度加快。因此要客服古典液相色譜的缺點(diǎn),就必須針對(duì)這些問題進(jìn)行研究。采取的措施就是要研制出粒度小,傳質(zhì)縮率塊的固定相;使液相色譜柱達(dá)到柱效高、分析時(shí)間短、靈敏度高的效果。下圖為兩種方法的比較:

 

HPLC月GC的比較

HPLC是在GC告訴發(fā)展的情況下發(fā)展起來的。他們之間的理論上和技術(shù)上有許多共同點(diǎn),主要有1色譜的基本理論是一致的2 定性定量原理*一樣3均可應(yīng)用計(jì)算機(jī)控制色譜操作條件和商鋪數(shù)據(jù)的處理程序,自動(dòng)化程度較高。

由于HPLC的流動(dòng)相是液體,二液體的粘度比氣體大100倍以上,擴(kuò)散系數(shù)比氣體小,故溶質(zhì)分子與液體流動(dòng)相之間的作用力不能忽略,致使HPLC與GC有一下差別

流動(dòng)想差別:

GC用氣體做流動(dòng)相,氣體與樣子分子之間作用力可忽略,而且,載氣種類少,性質(zhì)接近,改變載氣對(duì)柱效和分離效率影響小,HPLC以液體做流動(dòng)相,液體分子與樣品分子之間的作用力不能忽略。而且液體種類多,性質(zhì)差別大,既可以是水溶液,又可以時(shí)有機(jī)溶劑;既可以是極性化合物,又可以時(shí)非極性化合物,可供選擇范圍廣,是控制柱效和分離效率的中藥因素之一,使HPLC除了固定相的選擇外,增加了一個(gè)可供選擇的中藥的操作參數(shù)。

固定相差別

GC固定相多事固體吸附劑和擔(dān)體表面涂漬一層高沸點(diǎn)有機(jī)液體組成的液體固定相及今年出現(xiàn)的一些化學(xué)鍵合組。GC古興祥粒度粗(一般為100-250um)、吸附等問線多事非線性的,但成本低。HPLC固定相大都是新型的固體吸附劑,化學(xué)鍵合相等,力度小(一般為3-10um),分配等溫線多事線性的,峰形對(duì)稱,但成本高。樣品容量比GC高,分析型色譜柱zui大容量可達(dá)50mg以上。

使用范圍更廣

GC一般分析沸點(diǎn)500℃以上,相對(duì)分子質(zhì)量少于450的物質(zhì),而對(duì)熱穩(wěn)定性差,易于分解,變質(zhì)及具有生理活性的物質(zhì),都不能用升溫氣化的方法分析。因此GC只能分析占有機(jī)物總數(shù)15-20%的物質(zhì)

HPLC在溫室或接近室溫條件下工作,可分析沸點(diǎn)在500℃以上,相對(duì)分子質(zhì)量在450以上的有機(jī)物質(zhì)。這些有機(jī)物質(zhì)占總數(shù)的80-85%。HPLC的使用范圍遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過GC。

原理和結(jié)構(gòu)差別

液相色譜儀和氣象色譜儀在原理和結(jié)構(gòu)上亦有很大差別。液相色譜儀具有高壓輸液系統(tǒng),其檢測(cè)器的檢測(cè)原理和機(jī)構(gòu)與GC有較大差異。

應(yīng)指出,液相色譜和氣相色譜各有所長(zhǎng),互相補(bǔ)充。在HPLC越來越廣泛地獲得應(yīng)用的同時(shí),GC仍然返回這他的重要作用。

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