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當(dāng)前位置:江蘇菲亞生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>江蘇菲亞生物科學(xué)家鑒定凍存細(xì)胞的復(fù)蘇方法
細(xì)胞對(duì)凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入*生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。江蘇菲亞生物的科學(xué)家們經(jīng)過多年的實(shí)驗(yàn)研究鑒定凍存細(xì)胞的復(fù)蘇方法為:
(1)直接鋪板方法
●取出貯存細(xì)胞,37℃水浴中快速融化。
●直接用*生長(zhǎng)培養(yǎng)基鋪板細(xì)胞。1 ml凍存細(xì)胞使用10~20 ml*生長(zhǎng)培養(yǎng)基。進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù),細(xì)胞接種應(yīng)該至少在3×105活細(xì)胞/ml。
●培養(yǎng)細(xì)胞12到24小時(shí),更換新鮮的*生長(zhǎng)培養(yǎng)基,去除凍存劑。
(2)離心方法
●取出貯存細(xì)胞,37℃水浴中快速融化。
●把1到2 ml凍存細(xì)胞加入到大約25 ml*生長(zhǎng)培養(yǎng)基,輕輕混勻。
●以大約80x g離心2到3分鐘。
●棄去上清。
●在*生長(zhǎng)培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細(xì)胞,并且進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)。
●細(xì)胞鋪板,細(xì)胞接種應(yīng)該至少為3×105活細(xì)胞/ml。
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