實驗步驟：

1)       將所需數(shù)量的板條固定到板架上。

2)       將標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和已稀釋好的樣品分別用新的取樣吸頭取25μL加入到相應(yīng)的微孔中。

3)       室溫溫育5分鐘。

4)       在每一微孔中加入200μL酶聯(lián)物。

5)       充分混勻10秒，在這個步驟*混勻很重要。

6)       室溫孵育60分種。

7)       快速棄去孔內(nèi)反應(yīng)物，每孔用400μL蒸餾水洗板3次，在吸水紙上拍干。注意：洗板步驟是否正確操作會明顯影響實驗的靈敏度和度。

8)       在每一微孔中加入200μl底物液。

9)       室溫孵育15分種。

10)   加100μl終止液到每個檢測孔中終止酶反應(yīng)。

11)   加終止液后10分鐘之內(nèi)，用酶標(biāo)儀在450±10nm處測定OD 值。