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ELISA實驗不顯色的原因

閱讀:5422發(fā)布時間:2017-8-30

  ELISA實驗不顯色的原因,很多科研新手,可能都有這樣子的困擾,對于elisa實驗做的不理想,不顯色也有很多無奈,下面我們金益柏的操作人員就給您介紹一些詳細的elisa不顯色的原因以及處理方法。
 

ELISA實驗不顯色的原因圖片


  ELISA實驗不顯色的原因:


  1.包被原:包括你的包被液有無問題,有沒有配錯。包被原一般加100微升,37度2小時;


  2.封閉:封閉液用的是否適合?你說做了幾次都沒顯色,空白孔也不顯嗎?如果空白也無顏  色,那封閉就沒有問題。一般封閉是200微升每孔,也可以滿孔封閉


  3.一抗:檢查你的一抗是否失效。是否是在37度反應


  4.二抗:底物,底物緩沖液……這些都要好好檢查!


  5.洗滌:用PBST洗滌,包被和封閉時洗板3次;一抗二抗洗滌5次,每次間隔3分鐘。手工和機器洗滌沒什么不同,就是省力一些。洗5次不會有負影響,在一抗和二抗洗滌過程中,恰恰需要多洗幾次,這樣有助于減少非特異性吸附。


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