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冷凍保護(hù)劑的品質(zhì):
1):DMSO應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),無菌且無色(以0.22 micronFGLP flon 過濾或直接購(gòu)買無菌產(chǎn)品,如Sigma D-2650),以5-10 ml 小體積分裝,4℃避光保存,勿作多次解凍。
(ARO細(xì)胞信息:貼壁細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫(kù) 培養(yǎng)基、血清:90% RPMI-1640、10% 胎牛血清)
2):Glycerol 亦應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用,因長(zhǎng)期儲(chǔ)存后對(duì)細(xì)胞會(huì)有毒性。
研究發(fā)現(xiàn)艾滋病病毒往往會(huì)通過鎖定患者體內(nèi)CCR5蛋白的方式,對(duì)一種名為CD+4 T的細(xì)胞展開攻擊,破壞人類免疫系統(tǒng),但這種感染過程在一小部分歐洲人身上的進(jìn)展卻極為緩慢。
(人HUH7細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫(kù) 人肝癌細(xì)胞)
原因是其體內(nèi)與CCR5相關(guān)的基因發(fā)生了突變,產(chǎn)生了一種名為CCR5Δ32的副本。具備這種突變基因的人對(duì)艾滋病病毒具有天然的抵抗力。獲得這一發(fā)現(xiàn)后,用干細(xì)胞移植的方法,將這種突變基因轉(zhuǎn)入艾滋病患者體內(nèi),達(dá)到治愈艾滋病的目的。
(人Hep-3B2.1-7細(xì)胞 Hep3B細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫(kù) 人肝癌細(xì)胞)
新研究的目標(biāo)就是要在無需CCR5Δ32基因捐獻(xiàn)者的情況下,實(shí)現(xiàn)同樣的效果。借助第三代基因編輯技術(shù)CRISPR-Cas9系統(tǒng),在ips細(xì)胞中插入CCR5Δ32基因片段,而后將其培育成白細(xì)胞。
(人MG63細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫(kù) 人骨肉瘤細(xì)胞)
與傳統(tǒng)基因編輯技術(shù)相比,新技術(shù)效率更高,在插入位置上也更為。物理學(xué)家組織網(wǎng)6月11日?qǐng)?bào)道稱,目前簡(jiǎn)悅威的小組已經(jīng)證明,CRISPR-Cas9系統(tǒng)能夠有效地進(jìn)行基因編輯工作。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)培育出的具有CCR5Δ32基因片段的白細(xì)胞的確能夠免受艾滋病病毒的感染。
(人143B細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫(kù) 人骨肉瘤細(xì)胞)
還未將這些經(jīng)過基因編輯的iPS細(xì)胞培育成CD+4 T這樣特殊類型的白細(xì)胞。在細(xì)胞類型轉(zhuǎn)換和移植上,還有很多因素需要考慮,距臨床應(yīng)用還有很長(zhǎng)的一段路要走。但可以肯定的是,該成果為艾滋病的治療帶來了一種新可能。
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