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SK-N-BE細胞供應(人神經(jīng)母細胞瘤細胞實驗)

時間:2018/5/25閱讀:281
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為了您可以及時了解您所需要的細胞信息,建議直接細胞管理員,獲取說明書、價格、培養(yǎng)條件、培養(yǎng)操作注意事項等信息;

液體培養(yǎng)基:貯存于4℃冰箱,避免光照,實驗進行前放在37℃水槽中溫熱。 

(143B細胞信息:貼壁細胞     培養(yǎng)基:90%RPMI-1640    血清:10%胎牛血清 )

液體培養(yǎng)基(加血清) :存放期為六個月,期間glutamine 可能會分解,若細胞生長不佳,可以再添加適量glutamine。

SK-N-BE細胞供應(人神經(jīng)母細胞瘤細胞實驗)

采用RT-PCR方法從人外周血白細胞總RNA中釣取人可溶性b淋巴細胞刺激因子的cDNA片段,再運用基因重組手段, 利用通用型質(zhì)粒pBV220構(gòu)建表達載體pBV220/hsBLyS. 

(人Caov-4細胞 卵巢癌細胞)(人CoC1細胞 卵巢癌細胞)

經(jīng)測序鑒定后, 以之為模板使用重疊PCR法擴增得到hsBLyS的兩個點突變體hsBY-A(Cys146→Ala146) 和hsBY-V (Cys146→Val146)的基因片段, 構(gòu)建表達載體pBV220/hsBY-A及pBV220/hsBY-V. 

(人CoC1/DDP細胞 卵巢癌細胞耐藥株)(小鼠E.G7-OVA細胞 T淋巴瘤細胞)

經(jīng)測序無誤后, 將上述3種載體分別轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α并誘導重組蛋白質(zhì)表達, 薄層掃描結(jié)果顯示3種蛋白質(zhì)在DH5α中表達量都在20%--30%之間. 

(人ES-2細胞 卵巢透明細胞癌細胞)(人H4細胞 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞)

再分別運用變性、凝膠過濾層析及復性等手段純化目的蛋白質(zhì), zui后通過B淋巴細胞增殖實驗檢測純化產(chǎn)物促人B細胞增殖的活性. 

(人HaCaT細胞 永生化表皮細胞)(人HBL-100細胞 乳上皮細胞)

實驗結(jié)果表明, 3種重組蛋白質(zhì)都能明顯刺激人B細胞增殖;統(tǒng)計學檢驗顯示, 突變體rhsBY-V較野生型rhsBLyS的促人B淋巴細胞增殖活性顯著增強.

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