細胞:HNEpC細胞
中文名稱:人鼻粘膜上皮細胞
生長特性:貼壁細胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復(fù) 1 項操作或凍存。
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干細胞是一群有潛力分化成人類身體中所有類型細胞的超級細胞。而且,人類胚胎干細胞(hES) 對于某些危及生命的疾病來說,也同樣帶來了前所未_有的治療希望。
但是如何保存培養(yǎng)足夠量并且健康的細胞供患者移植使用則是目前面臨的一個大問題。
發(fā)現(xiàn)了一種可以維持大量的人類胚胎干細胞存活的方法,這一發(fā)現(xiàn)將可能降低干細胞移植治療的成本。研究人員發(fā)現(xiàn)分子神經(jīng)營養(yǎng)素(neurotrophins,NTs)對于人類胚胎干細胞能否在實驗室存活是很重要的。
雖然干細胞有潛力自我更新或分化成體內(nèi)任何一種細胞,但是如何以未分化的狀態(tài)保存活的人類胚胎干細胞仍是一大挑戰(zhàn)。
在這項新研究中,當(dāng)研究人員將神經(jīng)營養(yǎng)素生長因子家族的三名成員(腦衍生神經(jīng)滋養(yǎng)因子BDNF、神經(jīng)營養(yǎng)素 3 (NT-3)和神經(jīng)營養(yǎng)素 4 (NT-4))加入到培養(yǎng)的人類胚胎干細胞中,這些細胞的數(shù)量增加了36倍。
該研究結(jié)果表明用神經(jīng)營養(yǎng)素處理人類胚胎干細胞能迅速地生產(chǎn)更多人類胚胎干細胞。