細(xì)胞:SK-MEL-28細(xì)胞
中文名稱:人黑色素瘤細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:MEM+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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神經(jīng)干細(xì)胞的應(yīng)用:
神經(jīng)干細(xì)胞在神經(jīng)發(fā)育和修復(fù)受損神經(jīng)組織中發(fā)揮重要作用。神經(jīng)干細(xì)胞移植是修復(fù)和代替受損腦組織的有效方法 ,能重建部分環(huán)路和功能。(3T3-L1成纖維細(xì)胞 種屬:小鼠)
此外神經(jīng)干細(xì)胞可作為基因載體 ,用于顱內(nèi)腫瘤和其它神經(jīng)疾病的基因治療 ,利用神經(jīng)干細(xì)胞作為基因治療載體 ,彌補(bǔ)了病毒載體的一些不足。(BeWo胎盤絨膜癌細(xì)胞 種屬:人)
科研人員將神經(jīng)干細(xì)胞移植到帕金森病模型的鼠腦 ,神經(jīng)干細(xì)胞在其腦組織中遷移并修復(fù)損毀的腦組織 ,且震顫癥狀明顯減輕 ,可能是神經(jīng)干細(xì)胞分化成為多巴胺能神經(jīng)元起到治療作用。
多發(fā)性硬化是發(fā)病率較高的神經(jīng)系統(tǒng)疾病 ,在其嚙齒類動(dòng)物模型中發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生髓鞘的少突膠質(zhì)細(xì)胞被破壞或失去功能 ,將神經(jīng)干細(xì)胞直接移植到鼠腦中 ,移植的細(xì)胞在腦中發(fā)生了大范圍的遷移 ,在分化成的少突膠質(zhì)細(xì)胞中 ,約40 %的細(xì)胞形成了髓鞘 ,其特性非常接近正常狀態(tài) ,一些接受移植的動(dòng)物其典型的癥狀也得到了明顯的改善。(HCT 116結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 種屬:人 )
腦膠質(zhì)瘤是醫(yī)學(xué)治療的難點(diǎn)之一 ,手術(shù)切除腫瘤困難 ,且容易復(fù)發(fā) ,放療和化療對(duì)腫瘤有一定的作用。由于神經(jīng)干細(xì)胞具有遷移的功能 ,利用這種特性可以向腦部釋放藥物。(HK-2曲小管上皮細(xì)胞 種屬:人)
對(duì)鼠神經(jīng)干細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)基因處理 ,使之分泌IL-4,這種物質(zhì)能夠激活免疫系統(tǒng) ,對(duì)腫瘤細(xì)胞發(fā)生抗瘤攻擊 ,患有腦膠質(zhì)瘤的實(shí)驗(yàn)鼠接受這種細(xì)胞注射之后,壽命比未治療的實(shí)驗(yàn)鼠大大延長(zhǎng) ,核磁共振成像表明 ,實(shí)驗(yàn)鼠腦部的大塊腫瘤有縮小的跡象 ,有趣的是 ,既使注射的神經(jīng)干細(xì)胞不分泌IL-4,實(shí)驗(yàn)鼠的壽命也會(huì)延長(zhǎng)。
這是由于神經(jīng)干細(xì)胞還能分泌一種能夠減緩腫瘤細(xì)胞分裂的未知物質(zhì)的緣故。(COS-1腎細(xì)胞 種屬:猴)
神經(jīng)干細(xì)胞對(duì)于判斷藥效及藥物毒性等也有一定實(shí)用價(jià)值,如可以利用神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)觀察某些天然化合物和合成化合物的神經(jīng)活性 ,為發(fā)展小分子治療藥物提供理論基礎(chǔ)。