細胞:T/G HA-VSMC細胞
中文名稱:人主動脈平滑肌細胞
生長特性:貼壁細胞
培養(yǎng)基:SMCM+1%NEAA(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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神經(jīng)干細胞的分化機制:
神經(jīng)干細胞定向誘導分化調控是目前神經(jīng)干細胞研究的重大課題 ,腦內主要組織細胞包括神經(jīng)元、星形膠質細胞及少突膠質細胞等。(HuTu-80細胞 十二脂腸腺癌細胞 種屬:人)
大腦的功能主要依賴于神經(jīng)元并通過神經(jīng)信息的傳遞方式來實現(xiàn)。腦內神經(jīng)元種類繁多且功能極為復雜 ,如膽_堿能神經(jīng)元、兒茶酚胺能神經(jīng)元、5-羥色胺能神經(jīng)元及肽能神經(jīng)元等。
不同功能的神經(jīng)元分布在腦內不同的部位 ,通過合成及釋放相應的神經(jīng)遞質發(fā)揮各自獨_特的功能。
雖然神經(jīng)干細胞應用中還存在較多未解決的問題 ,但由于其廣闊的應用前景 ,仍成為世界上神經(jīng)科學界研究的熱點之一。(IAR20細胞 肝細胞 種屬:大鼠)
神經(jīng)干細胞的分化受基因調控?;虮磉_的時空方式受到其自身固有的分子程序的調控和周圍環(huán)境的影響。
胚胎干細胞向神經(jīng)干細胞的分化需要基因調控 ,特別是不同發(fā)育分化階段決定神經(jīng)干細胞向所需功能神經(jīng)細胞定向分化的主要調控基因。 (MFC細胞 前胃癌細胞 種屬:小鼠)
目前 ,雖然基因組測序已完成草圖 ,但基因組序列分析僅僅反映遺傳信息復雜性的一方面 ,而有關遺傳信息有序地、時相性地表達等復雜性的另一方面尚未完善。(RAW264.7細胞 白血病細胞 種屬:小鼠)
生物的類型變化主要是其內在的 ,所表達的基因是確定的 ,如分化細胞與祖細胞 ,腫瘤細胞與正常細胞等都存在著基因表達差別。(RCBBF細胞 成纖維細胞 種屬:兔)
若能在這些關系密切的細胞群之間發(fā)現(xiàn)那些有表達差別的基因 ,則可為這些相關細胞群所發(fā)生的復雜代謝和功能變化提供有意義的信息。(RCFBF細胞 成纖維細胞 種屬:兔)
Pevny等將神經(jīng)元特異性的Sox2基因轉染胚胎干細胞 ,再經(jīng)維甲酸誘導 ,可獲得90%以上的神經(jīng)細胞。
Giebel等表達Nurrl基因對于中腦神經(jīng)前體細胞分化為多巴胺能神經(jīng)元起決定作用。這些研究表明基因調控與神經(jīng)干細胞的定向分化密切相關。293KB細胞 胚腎細胞 種屬:人