細(xì)胞:HSC6細(xì)胞
中文名稱:人口腔鱗癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞比較研究體內(nèi)和體外的研究:
人胚胎干細(xì)胞能分化成人體的絕大多數(shù)細(xì)胞類群,諸如神經(jīng)細(xì)胞、心肌、骨骼肌、內(nèi)皮細(xì)胞、胃腸組織、肝細(xì)胞、β-胰島細(xì)胞、骨、軟骨、造血細(xì)胞等。
干細(xì)胞具有的能夠穩(wěn)定生存增殖并保持多向分化潛能的特性使其在遺傳性疾病和組織移植領(lǐng)域有著巨大的應(yīng)用前景。
根據(jù)個(gè)體發(fā)育過(guò)程中出現(xiàn)的先后次序不同,干細(xì)胞又可分為胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞。胚胎干細(xì)胞出現(xiàn)在胚胎發(fā)育的胚囊內(nèi)層,高水平表達(dá)端粒酶。
因?yàn)楂@取胚胎干細(xì)胞、建立胚胎干細(xì)胞系必須破壞胚囊,生命的定義目前尚無(wú)統(tǒng)一的認(rèn)識(shí),體外培養(yǎng)產(chǎn)生的胚囊是否具有生命還存在著廣泛的爭(zhēng)議,所以胚胎干細(xì)胞的分離、研究乃至用于臨床治療是否符合倫理道德的問(wèn)題引起了廣泛爭(zhēng)論。
一種觀點(diǎn)認(rèn)為受精卵產(chǎn)生就意味著新生命的誕生,破壞胚囊就意味著扼殺了一個(gè)新的生命。因此,胚胎干細(xì)胞的分離、研究及應(yīng)用都是違反倫理道德的。
SF763細(xì)胞 腦瘤細(xì)胞種屬:人
SF767細(xì)胞 腦瘤細(xì)胞種屬:人
SK-MEL-1細(xì)胞 黑色素瘤細(xì)胞種屬:人
觀點(diǎn)一:盡管胚胎干細(xì)胞的分離不符合傳統(tǒng)的道德觀念,但出于研究目的而分離胚胎干細(xì)胞可以被接受。
觀點(diǎn)二:受精卵如果未在母體子宮內(nèi)生長(zhǎng),就不會(huì)發(fā)育成為完整的個(gè)體,因而不能稱其為生命。利用這種體外受精產(chǎn)生的胚胎干細(xì)胞進(jìn)行研究和臨床治療,并不違反倫理道德。