細(xì)胞：DF-1細(xì)胞
中文名稱：雞胚成纖維細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫管理員，以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫管理員，避免不必要的損失；)
通過對(duì)藍(lán)豬耳(Torenia fournieri)活體胚囊的研究, 發(fā)現(xiàn)中央細(xì)胞和初生胚乳細(xì)胞中的微絲骨架在細(xì)胞核遷移時(shí)發(fā)生了顯著的變化.
授粉前, 微絲在中央細(xì)胞的周質(zhì)位置呈現(xiàn)短束狀隨機(jī)分布. 開花兩天后, 它們組裝成截然不同的微絲網(wǎng)絡(luò), 在這個(gè)階段, 次生核位于中央細(xì)胞中央位置并與短束狀的微絲列陣.
在授粉發(fā)生后不久, 分布在珠孔端的微絲發(fā)生片斷化, 此時(shí)次生核與卵器相鄰.
受精后, 初生胚乳細(xì)胞核從卵細(xì)胞處移開, 在初生胚乳細(xì)胞中微絲又重組形成清晰的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu).
用latrunculin A (LAT-A)和細(xì)胞松弛素B(cytochalasin B, CB)破壞微絲骨架, 得到的試驗(yàn)結(jié)果說明, 微絲參與了中央細(xì)胞中的細(xì)胞核遷移運(yùn)動(dòng). 數(shù)據(jù)也表明, 在受精過程中, 微絲骨架的動(dòng)力學(xué)特性在中央細(xì)胞和初生胚乳細(xì)胞的胞質(zhì)重組中起重要作用.
