細胞:C1A-FLS細胞
中文名稱:大鼠滑膜成纖維細胞
生長特性:貼壁細胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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發(fā)現(xiàn)使干細胞發(fā)育成神經(jīng)細胞物質(zhì)
胚胎干細胞是一種“原初細胞”,它能夠分化成肌細胞、血細胞、神經(jīng)細胞等不同細胞,進而發(fā)育成各種器官。
這種分化功能使胚胎干細胞具備了巨大的醫(yī)療應用潛力。胚胎干細胞要在分化因素的作用下,才能分化成特定的細胞。
過去只在細胞核層次上觀察到了影響胚胎干細胞分化方向的因素,比如某些酸成分作用于老鼠胚胎干細胞核,可以使其干細胞變成造血細胞、骨細胞等。
他們最近發(fā)現(xiàn)了胚胎干細胞中能與外來物質(zhì)結(jié)合、影響分化方向的蛋白質(zhì)受體。
在蛋白質(zhì)層次上觀察到與干細胞分化有關的因素。實驗還表明,兩種分別名為VIP和PACAP的肽能夠與胚胎干細胞中的蛋白質(zhì)受體結(jié)合,促使干細胞發(fā)育成神經(jīng)細胞。
此前的研究已證實,這兩種肽主要存在于人腦中,可以促進小腦的形成和發(fā)育,早期的胚胎含有這兩種物質(zhì)。
將這兩種肽作用于老鼠胚胎干細胞中的G蛋白質(zhì)受體后,發(fā)現(xiàn)這兩種肽的含量越高,胚胎干細胞分化出的神經(jīng)細胞就越多,這些神經(jīng)細胞最后發(fā)展成了神經(jīng)組織。
專家由此認定,在蛋白質(zhì)層次上,VIP和PACAP肽是影響胚胎干細胞分化為神經(jīng)細胞的因素,G蛋白質(zhì)受體是干細胞中負責接收這兩種肽的起誘導作用的受體。
專家指出,有關研究還需要進一步深入,以確定能否更有針對性地利用特定的肽,來誘導胚胎干細胞形成特定的神經(jīng)細胞。