細(xì)胞：MCF7細(xì)胞
中文名稱：人乳腺癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基 血清：10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，避免不必要的損失；)
通過(guò)DNA鏈的機(jī)械性能來(lái)研究DNA損傷
紫外線照射會(huì)損傷DNA，削弱其復(fù)制自己和與蛋白質(zhì)相互作用的能力，并通常導(dǎo)致皮膚癌的發(fā)生。但是，人們對(duì)于在紫外線照射下的DNA鏈的彈性變化了解得不多。
科學(xué)家們發(fā)展出一種技術(shù)，能夠測(cè)量在紫外線照射下的DNA機(jī)械性能的改變。
科學(xué)家使用一臺(tái)原子力顯微鏡測(cè)量了病毒DNA在紫外光下雙螺旋的拆開(kāi)過(guò)程。他們使用原子力顯微鏡的掃描針尖來(lái)拉伸DNA分子并測(cè)量因此產(chǎn)生的力的大小。
這些拉伸-放開(kāi)的測(cè)量能夠精確地測(cè)定DNA鏈的彈性改變。
結(jié)果表明，在紫外線的照射下，病毒DNA的彈性隨著紫外線照射劑量的增大產(chǎn)生顯著的變化。DNA的力學(xué)曲線的特征在于一個(gè)平臺(tái)部分。這個(gè)特征平臺(tái)的寬度隨著紫外線的照射急劇地減小。
紫外線能夠?qū)е翫NA與核苷酸鏈產(chǎn)生交聯(lián)，同時(shí)也會(huì)使相鄰的鏈連在一起，從而產(chǎn)生DNA損傷。這種交聯(lián)導(dǎo)致的微小的結(jié)構(gòu)改變能夠深深地改變DNA識(shí)別分子的能力，從而完_全破壞其復(fù)制自己和與轉(zhuǎn)錄合成蛋白質(zhì)的能力。
這個(gè)小組的科學(xué)家們還研究了合成的DNA以確定紫外線造成的影響范圍。他們的結(jié)論是：在紫外線下的病毒DNA的力學(xué)性質(zhì)決定于在局部區(qū)域由于大量的交聯(lián)形成而導(dǎo)致的DNA雙螺旋的伸直。
