細(xì)胞:HCT 116細(xì)胞
中文名稱(chēng):人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀(guān)察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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新研究發(fā)現(xiàn)多個(gè)大腦神經(jīng)細(xì)胞新類(lèi)型
借助高質(zhì)量的成年小鼠腦片,他們對(duì)大腦神經(jīng)細(xì)胞進(jìn)行分類(lèi),找到多個(gè)以前未被描述過(guò)的神經(jīng)細(xì)胞類(lèi)型,揭開(kāi)了神秘大腦的又一層面紗。
重建了一個(gè)大腦視皮層神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)連接圖,相信這項(xiàng)研究是近年神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域一項(xiàng)里程碑式的成果,對(duì)今后大量神經(jīng)疾病和精神疾病的研究也有里程碑式的意義。”
受技術(shù)限制,以前體外腦片培養(yǎng)技術(shù)只能運(yùn)用于耐缺氧能力較強(qiáng)的幼年動(dòng)物的腦組織,但成年動(dòng)物腦的結(jié)構(gòu)和功能與發(fā)育中的幼年動(dòng)物大腦并不相同。
一種新的動(dòng)物腦片制備技術(shù),可極大提高腦細(xì)胞在腦片中的存活率。采用并優(yōu)化了該技術(shù),制備出高質(zhì)量的成年小鼠腦片。
神經(jīng)細(xì)胞可分為兩大類(lèi):興奮性神經(jīng)細(xì)胞和抑制性神經(jīng)細(xì)胞。興奮性神經(jīng)細(xì)胞比較相似,而抑制性神經(jīng)細(xì)胞呈現(xiàn)多樣性。
先前采用的一些分類(lèi)方法較為粗糙,不能充分區(qū)分抑制性神經(jīng)細(xì)胞。而他們考慮了抑制性神經(jīng)細(xì)胞的所有特性,包括生物分子標(biāo)記物、細(xì)微形態(tài)結(jié)構(gòu)、電生 特性等,然后運(yùn)用可同時(shí)進(jìn)行多通道記錄的膜片鉗技術(shù),對(duì)成年小鼠大腦視皮層神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)展開(kāi)研究。
我們發(fā)現(xiàn)抑制性神經(jīng)細(xì)胞的種類(lèi)遠(yuǎn)比先前知道的要多。比如,就我們研究的皮質(zhì)細(xì)胞層來(lái)說(shuō),共有15類(lèi)抑制性神經(jīng)細(xì)胞,很多種類(lèi)從來(lái)沒(méi)有被報(bào)道和描述過(guò).