細(xì)胞：MDA-MB-435S細(xì)胞
中文名稱：人乳腺癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：L15+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，避免不必要的損失；)
研究發(fā)現(xiàn)大腸桿菌能量代謝極穩(wěn)定
研究人員通過(guò)詳細(xì)分析大腸桿菌核糖核酸、蛋白質(zhì)的有關(guān)指標(biāo)和代謝產(chǎn)物的量，證實(shí)這種微生物為了維持生命活動(dòng)，其細(xì)胞的能量代謝極其穩(wěn)定。這一發(fā)現(xiàn)有助于微生物培養(yǎng)和藥劑分析方面的研究。
研究人員培養(yǎng)了約4000種基因突變的大腸桿菌，每種大腸桿菌都有某一個(gè)基因不能表達(dá)。
此后，研究人員分析哪些菌株的基因與能量代謝相關(guān)且發(fā)生了突變，把這樣的菌株篩選出來(lái)，分析其核糖核酸和蛋白質(zhì)的有關(guān)指標(biāo)及糖類代謝產(chǎn)物的量，并與正常大腸桿菌進(jìn)行比較。
結(jié)果顯示，被比較對(duì)象的核糖核酸和蛋白質(zhì)的有關(guān)指標(biāo)及代謝產(chǎn)物的量都沒有明顯差別。由此可以推斷，大腸桿菌的能量供應(yīng)體系保證它們即使損失部分基因功能，也可以進(jìn)行穩(wěn)定的能量代謝。
研究人員再將大腸桿菌放置到不同營(yíng)養(yǎng)環(huán)境下培養(yǎng)。結(jié)果，大腸桿菌的核糖核酸和蛋白質(zhì)的有關(guān)指標(biāo)都出現(xiàn)了變化，唯_獨(dú)代謝產(chǎn)物的量沒有發(fā)生變化。
大腸桿菌擁有不同的方式來(lái)保證能量代謝的穩(wěn)定。了解大腸桿菌等微生物的能量代謝特點(diǎn)，有助于有益微生物的培育改良和分析某些藥劑的作用機(jī)制。
