細胞:3T3-L1細胞
中文名稱:小鼠脂肪細胞
生長特性:貼壁細胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%CS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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新發(fā)現(xiàn)的名為IQ-1的小分子在防止胚胎干細胞分化成一種或多種特殊細胞方面具有決定性作用;
該研究成果有望幫助人們開發(fā)出無污染大規(guī)模培養(yǎng)胚胎干細胞的方法,干細胞療法是許多研究的項目,大規(guī)模培養(yǎng)胚胎干細胞是干細胞療法成功發(fā)展的前提。
目前,實驗鼠纖維原細胞飼養(yǎng)層被證明為能夠培養(yǎng)胚胎干細胞的方法,必要的化學信號能促使胚胎干細胞不斷分裂而不分化。
人體胚胎干細胞用飼養(yǎng)層培養(yǎng)會遭受實驗鼠糖蛋白標識的污染,如果將培養(yǎng)的干細胞用于人體,或許出現(xiàn)可怕的免疫反應。
研究人員發(fā)現(xiàn)的小分子幫助人們向?qū)崿F(xiàn)無實驗鼠纖維原細胞飼養(yǎng)層培養(yǎng)胚胎干細胞的方法往前邁進了一步。
對于IQ-1的工作原理,Wnt通道(也就是細胞信號通道)對干細胞具有分叉效應,IQ-1能夠在阻斷Wnt通道一個分叉的同時,增強來自Wnt通道另分叉的信號。
人們可以從根本上維持干細胞的生長和所需的力量,如果人們能夠創(chuàng)造出一個化學物質(zhì)環(huán)境的系統(tǒng)來培養(yǎng)人體胚胎干細胞,那么就可以避免干細胞受污染的危險,它將讓科學家的工作更加容易,這是研究小組的奮斗目標。