細(xì)胞：SW620細(xì)胞
中文名稱(chēng)：人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基 血清：10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀(guān)察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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神經(jīng)干細(xì)胞命運(yùn)決定機(jī)制
新皮層的發(fā)生過(guò)程是胚胎發(fā)育期神經(jīng)發(fā)生、遷移和分化各個(gè)過(guò)程精妙調(diào)控的結(jié)果。
新皮層中神經(jīng)干細(xì)胞分化和子代細(xì)胞命運(yùn)決定的分子機(jī)制是神經(jīng)生物學(xué)領(lǐng)域目前研究的熱點(diǎn)及難點(diǎn)。
該領(lǐng)域的研究主要集中在轉(zhuǎn)錄因子、微環(huán)境結(jié)構(gòu)和信號(hào)通路及表觀(guān)遺傳修飾上。
研究表明，表觀(guān)遺傳因子Rcor1在新皮層發(fā)生中發(fā)揮了重要作用。而同蛋白家族的Rcor2基因，其功能及作用機(jī)理仍不清楚。
在這項(xiàng)研究中，研究人員以多種Rcor2缺陷或敲入的小鼠模型為研究對(duì)象，運(yùn)用體內(nèi)發(fā)育追蹤和體外培養(yǎng)分化等模型，首_次揭示了Rcor2作為組蛋白去甲基化酶LSD1的co-repressor在新皮層發(fā)育過(guò)程中的表觀(guān)調(diào)控作用及機(jī)制。
同時(shí)，結(jié)合高通量測(cè)序和生物信息學(xué)分析，發(fā)現(xiàn)Rcor2-LSD1蛋白復(fù)合物直接作用于Shh信號(hào)通路的相關(guān)基因，通過(guò)抑制Shh信號(hào)通路在背側(cè)皮層發(fā)育過(guò)程中的活性，維持該區(qū)域神經(jīng)干細(xì)胞的正常增殖及神經(jīng)發(fā)生的正常進(jìn)行。
