細胞:C26細胞
中文名稱:小鼠結(jié)腸癌細胞
生長特性:貼壁細胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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一個簡單的88基因刻度表來測量干細胞的有用性。這個刻度表或許可以幫助查明他們是否能將成體干細胞--例如血液和皮膚的干細胞--轉(zhuǎn)化為由修復組織的意料價值的干細胞。
這88個基因是小鼠早期胚胎或干細胞培養(yǎng)物中頻繁被激活的近3000個基因中的一個亞組;
研究發(fā)現(xiàn)這個亞組基因活性的變化與干細胞分化成其它細胞類型的能力有關聯(lián)。直到現(xiàn)在,檢驗干細胞分化潛力的途徑就是對其進行培養(yǎng),然后檢查其后代。
例如,一個剛剛受精、能夠產(chǎn)生機體內(nèi)任何一種細胞類型的卵子在分析中得一分;能分化為血液或神經(jīng)細胞的成熟一點的細胞也得一分。
我們將測定這88個基因的活性來確定干細胞處于什么階段,這個刻度表可以揭示實驗室培養(yǎng)的干細胞是否真的與特殊胚胎組織中的干細胞功效一樣。
許多研究人員都在竭力了解在胚胎干細胞、成體干細胞和心臟或大腦細胞中,分別有什么樣的基因組合被打開。了解這些,可以揭示出將一種細胞類型轉(zhuǎn)化為另一類型的方法,從而用于心臟病、帕金森氏癥等多種疾病的治療。
這88個基因并不一定就是驅(qū)動這種細胞轉(zhuǎn)化的基因。他們可能只是在這個轉(zhuǎn)變中改變。
通過類似的方法,研究小組找到10個似乎刻畫人類胚胎干細胞特征的基因。希望用這些基因,為臨床試驗提供源源不斷的胚胎干細胞供應。