細(xì)胞:4T1細(xì)胞
中文名稱(chēng):小鼠乳腺癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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α-突觸蛋白是帕金森病病理標(biāo)志路易小體的主要成分,其對(duì)突觸活性的維持有重要作用。
大量研究顯示,細(xì)胞外α-突觸蛋白的積聚有細(xì)胞毒性,可致細(xì)胞死亡。另一方面,α-突觸蛋白還被證實(shí)有神經(jīng)保護(hù)作用。
研究顯示細(xì)胞外納摩爾濃度級(jí)的α-突觸蛋白可通過(guò)PI3/Akt信號(hào)通路對(duì)抗應(yīng)激反應(yīng),保護(hù)神經(jīng)元,升高的-突觸蛋白表達(dá)也可預(yù)防百草_枯誘導(dǎo)的多巴胺能神經(jīng)元退變。
從已有的研究可見(jiàn),納摩爾濃度級(jí)的α-突觸蛋白對(duì)神經(jīng)元究竟是保護(hù)還是損傷作用尚無(wú)定論。
50和100nmol/L 的納摩爾級(jí)濃度α-突觸蛋白可促進(jìn)多巴胺能神經(jīng)細(xì)胞系--神經(jīng)元分化的SH-SY5Y細(xì)胞的存活,且該作用不是通過(guò)細(xì)胞增殖實(shí)現(xiàn)的。
同時(shí),還得到該作用途徑是Akt通路的結(jié)論。研究為延緩帕金森病后神經(jīng)元退變找到了可能的作用靶點(diǎn)。