細胞：H2009細胞
中文名稱：人肺腺癌細胞
生長特性：貼壁細胞
培養(yǎng)基：MEM+10%FBS +1%ITS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)，Cas9蛋白可以結合并切割任意DNA。一種新方式使用Cas9，讓它激活特定基因的轉錄，從而表達或抑制特定的遺傳學性狀。把Cas9與延長了三倍的轉錄因子融合起來，使其能夠強力控制單個或多個基因的表達。
在基因工程領域，能控制遺傳學性狀的旋鈕越多越好。它們可以控制多個基因，決定特定遺傳學性狀的表達或表達程度。現(xiàn)在我們可以極為精確的上調或下調基因表達。在體外培養(yǎng)的酵母、小鼠和人類細胞中證實了這一技術操縱基因表達的能力。
人類基因組90%的區(qū)域并不翻譯成蛋白質，曾經(jīng)被認為是無用的垃圾。后來發(fā)現(xiàn)，這一區(qū)域的基因以一種神秘的方式起作用，而且這些基因往往串聯(lián)起來發(fā)揮作用。開發(fā)的新方法，可以靶標和激活這些人們知之甚少的DNA暗物質。
除了揭開DNA暗物質的秘密，Cas9還能將合成的基因環(huán)引入基因組，觸發(fā)全新的基因表達或者改變基因表達。用 Cas9精確操縱一連串基因，對干細胞工程也有很大的幫助，有助于開發(fā)移植用的器官和再生療法。
必須加快對發(fā)育生物學的理解，可以快速干擾和分析大量基因組合，大大提升鑒定發(fā)育通路的速度。
誘導干細胞分化成大腦神經(jīng)元。Cas9在編程神經(jīng)元發(fā)育時比傳統(tǒng)方法好40倍。
