細(xì)胞:RD細(xì)胞
中文名稱:人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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干細(xì)胞存在性別差異,從雌性小鼠肌肉中提取的干細(xì)胞比雄性肌肉中提取的更易分化為身體組織。
所使用的干細(xì)胞幾乎全部來自雌性小鼠。隨后對來自雄性和雌性的干細(xì)胞分別進(jìn)行實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)兩者確實(shí)存在差異。
胚胎干細(xì)胞可以分化為各種身體組織,而從成年動物中提取的肌肉干細(xì)胞則僅能分化為少數(shù)幾種組織。
研究人員將從健康小鼠中提取的肌肉干細(xì)胞注射到患有基因疾病的小鼠體內(nèi),其中一些疾病類似人類的肌原性肌肉weisuo癥等。
在注射了干細(xì)胞后,研究測量了干細(xì)胞再生肌肉纖維的能力,隨后發(fā)現(xiàn)雌性干細(xì)胞比雄性干細(xì)胞能產(chǎn)生更多肌肉纖維。
不管患病的小鼠是雄性還是雌性,注射雌性干細(xì)胞總是有著更好的骨骼肌再生能力。
研究者認(rèn)為,這一差異的來源可能是由于雌性干細(xì)胞能更好應(yīng)對免疫反應(yīng)。
當(dāng)干細(xì)胞被注射后,有關(guān)的身體組織會發(fā)炎,肝細(xì)胞將面對許多自由基。這時(shí),雄性干細(xì)胞的自我復(fù)制將會被阻礙。