細(xì)胞:NPA細(xì)胞
中文名稱:人甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:L15+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細(xì)胞培養(yǎng)請咨詢細(xì)胞庫管理員,以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn),操作前,如果有不明白之處,先咨詢細(xì)胞庫管理員,避免不必要的損失;)
研究發(fā)現(xiàn)趨化因子似乎還能吸引干細(xì)胞到損傷位點(diǎn)。至少在腦癱動物模型中,這種有治療功效的化合物僅在受傷后幾天存在于傷口。
正常情況下,在大腦損傷后會自然產(chǎn)生chemokines,并且是大腦自然修復(fù)過程的一部分,但可能由于產(chǎn)生的量不夠和持續(xù)產(chǎn)生時間不夠長,所以不能達(dá)到治愈的效果。因此我們希望添加外源的趨化因子,以便在損傷發(fā)生長時間后繼續(xù)促進(jìn)新細(xì)胞在傷口中的整合。
嘗試幾種直接的方法:包括將chemokines先注射到受損位點(diǎn)然后注射干細(xì)胞;以及兩種物質(zhì)同時注射。在注射前Carroll將會利用病毒感染細(xì)胞的能力將chemokines送入干細(xì)胞中。
盡管干細(xì)胞是未成熟的、可以分化成為各種細(xì)胞的多能細(xì)胞,但供體的干細(xì)胞可能會引發(fā)一種類似移植器官的免疫反應(yīng)。
使用免疫抑制劑環(huán)孢霉_素A來提高移植成功率,并與不用抑制劑的對照進(jìn)行比較成功率。他也會觀察是否這種動物模型的動作技能在移植后有所改善。
盡管認(rèn)為干細(xì)胞治療有一天會幫助恢復(fù)腦癱造成的大腦功能喪失,但還有許多問題沒有找到答案。其中的一個問題就是,這種不斷增殖的細(xì)胞是否會導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。還有,腦癱是一種很復(fù)雜的疾病而不是一個單純的問題,在這種疾病中最終可能所有的大腦細(xì)胞類型都需要修復(fù)。