細(xì)胞：RINm5f細(xì)胞
中文名稱：大鼠胰島β細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基 血清：10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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在人多種胚胎組織如胰腺、骨髓、肝臟、皮膚、骨骼肌和肺等中分離出具有多系分化潛能的原始干細(xì)胞，在適當(dāng)條件下可向脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、肝臟樣上皮細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞及造血細(xì)胞分化；
將其輸入接受超致死劑量射線照射的受體小鼠，可重建受體小鼠的造血功能；并可在小腸、肝、肺、皮膚及造血等多種組織中分化和再生；
分離獲得的Flk1+CD31-CD34-細(xì)胞具有高度的分化潛能，在體內(nèi)不僅參與造血重建及微血管損傷的修復(fù)，而且還能分化為氣管、肺、消化道上皮細(xì)胞以及肝細(xì)胞等。
將新鮮人臍帶血中分離和純化的Lin-CD34+CD38-造血干/祖細(xì)胞通過(guò)宮內(nèi)注射移植到胎山羊體內(nèi)，成功建立了山羊/人干細(xì)胞嵌合體，為評(píng)估人造血干細(xì)胞長(zhǎng)期移植存活、擴(kuò)增和分化提供了一種大動(dòng)物模型，也為組織損傷的修復(fù)、異種移植、免疫耐受性和產(chǎn)前治療的研究等提供了技術(shù)平臺(tái)。
應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄病毒載體MSCV-BCR-ABL-IRES-GFP轉(zhuǎn)染Lin-CD34+CD38-造血干/祖細(xì)胞，通過(guò)宮內(nèi)注射到胎齡為45-55天的胎山羊腹腔內(nèi)，使含有BCR/ABL基因的人造血干/祖細(xì)胞長(zhǎng)期植活于山羊的不同組織中，建立了CML的大動(dòng)物模型，為分析人類CML和其他疾病的發(fā)病機(jī)制及治療提供了良好的研究手段。
研究表明，來(lái)自多種組織的ASC移植可治療多種疾病。然而，人們對(duì)ASC分子生物學(xué)特性了解尚少，阻礙了ASC的體外培養(yǎng)和體內(nèi)組織再生研究和應(yīng)用。
