細(xì)胞:MDA-MB-415細(xì)胞
中文名稱(chēng):人乳腺腺癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:L15+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢(xún)細(xì)胞庫(kù)管理員,以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn),操作前,如果有不明白之處,先咨詢(xún)細(xì)胞庫(kù)管理員,避免不必要的損失;)
干細(xì)胞揭示神經(jīng)元異常興奮與蛋白錯(cuò)誤折疊的關(guān)系
研究發(fā)現(xiàn)這些突變對(duì)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的改變和小鼠中發(fā)現(xiàn)的變化是一致的。研究人員使用臨床抗癲癇藥物發(fā)現(xiàn)其對(duì)神經(jīng)元的作用,并發(fā)現(xiàn)其能夠降低這些細(xì)胞的異?;顒?dòng)。
接下來(lái)創(chuàng)建了更多的由其他突變導(dǎo)致ALS的患者干細(xì)胞產(chǎn)生的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元,【人MDA-MB-157細(xì)胞 來(lái)源:通派細(xì)胞庫(kù) 人乳癌細(xì)胞】甚至包括沒(méi)表征ALS的人,來(lái)觀察特定的突變對(duì)ALS的影響。
研究表示ALS的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元在發(fā)放動(dòng)作電位的頻率上散發(fā)性的增加,而健康的細(xì)胞并沒(méi)有受刺激?!救薓DA-MB-134Ⅵ細(xì)胞 來(lái)源:通派細(xì)胞庫(kù) 人乳導(dǎo)管癌細(xì)胞】發(fā)現(xiàn)了神經(jīng)元活動(dòng)的異常興奮性與異常的蛋白折疊之間。
在這兩項(xiàng)工作中研究描述了超興奮的ALS神經(jīng)元如何產(chǎn)生更多的異常蛋白折疊并進(jìn)一步增加興奮性的過(guò)程,【人H2087細(xì)胞 來(lái)源:通派細(xì)胞庫(kù) 人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞】這個(gè)周期性循環(huán)將神經(jīng)元處于非常脆弱的狀態(tài)并導(dǎo)致死亡。
表示單一機(jī)制的聚集提供了非常吸引人的治療靶點(diǎn)?!救薍2227細(xì)胞 來(lái)源:通派細(xì)胞庫(kù) 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞】此次研究發(fā)現(xiàn)在ALS運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元上鉀離子通道減少了,因此如果在這些超興奮的神經(jīng)元上使用藥物開(kāi)放鉀離子通道就能降低其興奮性;
而使用的抗驚厥藥物retigabine能夠使這種興奮性回歸正常?!救薍596細(xì)胞 來(lái)源:通派細(xì)胞庫(kù) 人肺腺鱗癌細(xì)胞】因此,研究團(tuán)隊(duì)將進(jìn)一步檢測(cè)對(duì)ALS患者使用該藥物的副作用,還將檢測(cè)該藥物是否與ALS有異常的相互作用。