細(xì)胞:HL-7702細(xì)胞
中文名稱:人肝細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
HL-7702細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫管理員,以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn),操作前,如果有不明白之處,先咨詢細(xì)胞庫管理員,避免不必要的損失;)
NO信號(hào)誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡的機(jī)制
長期肺動(dòng)脈高壓能導(dǎo)致心衰和心肌重塑,最終導(dǎo)致心肌細(xì)胞凋亡。這已成為許多心肌疾病的最終結(jié)果。但何種因子參與這一過程并不清楚。一氮化氮(NO)信號(hào)可能在張力誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡中扮演關(guān)鍵性角色。(人Raji細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人Burkitt B淋巴瘤細(xì)胞)
研究表明,張力能不僅能誘導(dǎo)內(nèi)皮型NOS(eNOS),而且還誘導(dǎo)誘導(dǎo)型NOS(iNOS)的表達(dá),促進(jìn)NO的合成。而持續(xù)不斷的iNOS表達(dá)增加也在在體的高血壓大鼠心臟中觀察到。(人NC-37細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人Burkitt B淋巴瘤細(xì)胞)
而阻斷NO信號(hào)或下調(diào)ODQ能顯示抑制張力誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡和線粒體去極化,以及Cyt-C釋放過程,這提示NO在張力誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡中扮演重要角色。(人NAMALWA細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人Burkitts B淋巴瘤細(xì)胞)
進(jìn)一步研究表明,iNOS表達(dá),但不是eNOS,能被L-NAME和ODQ,因此這種NO信號(hào)應(yīng)該來自于iNOS,而不是eNOS。(鼠MUTZ-1細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 骨髓增生異常綜合征細(xì)胞)
進(jìn)一步采用鈣信號(hào)抑制劑處理,同樣能降低NO水平,這表明起始的鈣離子依賴的NO合成,進(jìn)而誘導(dǎo)iNOS表達(dá),導(dǎo)致NO上升,這是促進(jìn)心肌細(xì)胞凋亡的關(guān)鍵信號(hào)通路。(大鼠PC12細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞)