細(xì)胞:H4細(xì)胞
中文名稱:人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
H4細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫管理員,以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn),操作前,如果有不明白之處,先咨詢細(xì)胞庫管理員,避免不必要的損失;)
哺乳動(dòng)物缺失模型對(duì)miRNA靶標(biāo)研究有效
miRNAs是一種21-25nt長的單鏈小分子RNA,對(duì)于它的研究起始于時(shí)序調(diào)控小RNA(stRNAs),由于miRNAs在物種進(jìn)化中相當(dāng)保守
在植物、動(dòng)物和真菌中發(fā)現(xiàn)的miRNAs只在特定的組織和發(fā)育階段表達(dá),(人AU565細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人乳癌細(xì)胞)而且這種特異性和時(shí)序性,決定了組織和細(xì)胞的功能特異性,表明miRNA在細(xì)胞生長和發(fā)育過程的調(diào)節(jié)過程中起多種作用,因此miRNA的研究受到了生物學(xué)家的廣泛關(guān)注。
但是經(jīng)過了前期的研究,(人HMSC細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人間充干細(xì)胞)有關(guān)哺乳動(dòng)物體內(nèi)特異性miRNAs靶向刪除必要性仍然知之甚少,并對(duì)于mRNA靶標(biāo)的可靠預(yù)測(cè)依然存在問題
研究人員提出miRNA生物生成對(duì)于小鼠心臟發(fā)生而言是必需的,(人HPDLF細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人牙髓成纖維細(xì)胞)而且在對(duì)肌肉特異性miRNA:miR-1-2的研究中,他們發(fā)現(xiàn)miR-1-2參與扮演的角色眾多,包括心肌形態(tài)形成(cardiac morphogenesis),電傳導(dǎo),細(xì)胞周期調(diào)控。
進(jìn)一步對(duì)miR-1互補(bǔ)序列進(jìn)行分析,(人Calu-3細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人肺腺癌細(xì)胞 )發(fā)現(xiàn)了一個(gè)miR-1匹配點(diǎn)(seed matches)富集區(qū),以及miR-1潛在結(jié)合位點(diǎn)定位在物理性可接觸區(qū)域的一種傾向。
這些發(fā)現(xiàn)說明miRNA數(shù)量的精細(xì)差別在哺乳動(dòng)物中有重要的影響,并且哺乳動(dòng)物缺失模型在miRNA靶標(biāo)研究方面的有效性。