細(xì)胞:TSCCA細(xì)胞
中文名稱:人舌鱗癌細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
TSCCA細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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細(xì)胞周期可以分為G1期、S期、G2期和M期。G1期細(xì)胞體積增大并合成DNA復(fù)制所需的蛋白。在S期、G2期和M期中,DNA進(jìn)行復(fù)制,細(xì)胞為有絲分裂做準(zhǔn)備,(人WRL68細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人肝細(xì)胞)并最終分為兩個(gè)子細(xì)胞。先前的細(xì)胞分裂模型建立于1973年,它只能預(yù)測(cè)細(xì)胞周期的總長度。
通過time-lapse顯微成像,跟蹤了單個(gè)B細(xì)胞和T細(xì)胞的分裂過程。(小鼠L929細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 小鼠成纖維細(xì)胞)深入分析了細(xì)胞周期的每個(gè)階段,并記錄了各階段所用的時(shí)間。
研究發(fā)現(xiàn),對(duì)于不同細(xì)胞而言,分裂各階段所用的時(shí)間并不相同。(人Ecv304細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞)可以將細(xì)胞周期時(shí)間看作一根橡皮筋,每個(gè)分裂階段都在橡皮筋上有固定的位置,它們之間的比例相同。但橡皮筋本身是可以伸縮的,這就會(huì)延長或縮短各階段的時(shí)間。
研究不僅提出了一個(gè)更完善的細(xì)胞分裂模型,也有助于解釋同類細(xì)胞之間的細(xì)胞周期差異。之前的模型認(rèn)為時(shí)間差異主要來自于G1期,(人95d-nc細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人高轉(zhuǎn)移肺腺癌細(xì)胞)而S/G2/M期的時(shí)間是固定不變的,它使用一個(gè)被稱為‘transition probABIlity’的概念,來預(yù)測(cè)整個(gè)細(xì)胞群體的行為,但并不適用于單個(gè)的細(xì)胞。
在新數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)上建立了新的模型,(5-8f-m細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 鼻咽癌細(xì)胞)以便更準(zhǔn)確的預(yù)測(cè)細(xì)胞的分裂情況,研究發(fā)現(xiàn),兩個(gè)子細(xì)胞的分裂時(shí)間相同,但它們與母細(xì)胞的分裂時(shí)間并不一樣。
這說明,母細(xì)胞早在分裂之前就已經(jīng)編程好了子細(xì)胞的分裂時(shí)間,(大鼠Nrk-52e細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 大鼠腎小管上皮細(xì)胞)但這一信息不會(huì)跨世代傳遞下去,當(dāng)子細(xì)胞分裂時(shí)又會(huì)重置其后代的分裂時(shí)間。不過研究人員現(xiàn)在還不清楚這種時(shí)間設(shè)定的具體機(jī)制。
這項(xiàng)研究的模型可以更簡便地預(yù)測(cè),B細(xì)胞和T細(xì)胞的分裂情況,這一機(jī)制是否同樣適用于機(jī)體內(nèi)的其他細(xì)胞,還有待于進(jìn)一步的證實(shí)。