細(xì)胞:EJ-1細(xì)胞
中文名稱:人膀胱癌細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
EJ-1細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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Nature人類胚胎干細(xì)胞的穩(wěn)定性
實(shí)驗(yàn)室培育人類胚胎干細(xì)胞的過程不會(huì)影響基因的穩(wěn)定性。這為人類干細(xì)胞療法提供了安全依據(jù)。
隨著人類胚胎干細(xì)胞研究的深入,(通派細(xì)胞庫供應(yīng):SK-BR-3細(xì)胞)開始擔(dān)心實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)液而不是人類子宮中培養(yǎng)干細(xì)胞的方法會(huì)使基因“印記”過程發(fā)生改變,從而培養(yǎng)出與預(yù)期不同的組織細(xì)胞。
在正常的發(fā)育過程中,基因“印記”就是胚胎干細(xì)胞根據(jù)外部遺傳信息,(通派細(xì)胞庫供應(yīng):AU565細(xì)胞)使繼承自父方或母方的一個(gè)基因副本上的基因“開啟”或“關(guān)閉”的過程。
科學(xué)家擔(dān)心實(shí)驗(yàn)室方法會(huì)破壞該過程,因此認(rèn)為胚胎干細(xì)胞的不穩(wěn)定是阻礙其發(fā)展的一大難題。
英國劍橋大學(xué)的科學(xué)家對4組不同的人類胚胎干細(xì)胞進(jìn)行研究,(通派細(xì)胞庫供應(yīng):HMSC細(xì)胞)考察了75個(gè)可能被“印記”的基因中的6個(gè)。
結(jié)果證明,這些被“印記”的基因沒有發(fā)生任何變化。(通派細(xì)胞庫供應(yīng):HPDLF細(xì)胞)可能其他被“印記”的基因會(huì)出現(xiàn)問題,但研究結(jié)果顯示基因穩(wěn)定性是人類胚胎干細(xì)胞的一個(gè)重要特征,因此說明利用這種細(xì)胞培育其他組織的過程是安全的。
人類胚胎干細(xì)胞是人類胚胎中保留的未成熟細(xì)胞。(通派細(xì)胞庫供應(yīng):Calu-3細(xì)胞)它幾乎能分化為所有的人體細(xì)胞。此前科學(xué)家已經(jīng)從克隆人類胚胎中分離出干細(xì)胞。
通過實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng),這些細(xì)胞能夠轉(zhuǎn)化成健康的人體組織,以替代患者的疾病器官,達(dá)到治療目的。