細(xì)胞：Mv.1.Lu細(xì)胞
中文名稱：貂肺上皮細(xì)胞
生長特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：MEM+1%NEAA+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
Mv.1.Lu細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫管理員，以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫管理員，避免不必要的損失；)
研究小組選定了兩個(gè)miRNA相關(guān)基因：miR-1-1 and miR-1-2，(通派細(xì)胞庫供應(yīng)：WISH細(xì)胞株)這兩個(gè)基因產(chǎn)物在心臟和肌肉組織中大量表達(dá)。
由于在胚胎結(jié)構(gòu)中定位miRNAs十分困難，(通派細(xì)胞庫供應(yīng)：L-o2細(xì)胞株)所以研究人員利用了一個(gè)可以產(chǎn)生藍(lán)點(diǎn)的報(bào)告基因來便于定位miRNAs。
他們將報(bào)告基因接到miR-1-1的前端，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在胚胎期小鼠的心臟和肌肉中都發(fā)現(xiàn)有報(bào)告基因的表達(dá)，(通派細(xì)胞庫供應(yīng)：Chang Liver細(xì)胞株)并且這種表達(dá)受到幾個(gè)心臟和肌肉關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子(serum response factor (SRF), Mef2 和 MyoD)的調(diào)控。
這個(gè)結(jié)果表明miRNAs就像其它一般的基因一樣的受到調(diào)控，(通派細(xì)胞庫供應(yīng)：HL-7702細(xì)胞株)因此可能miRNAs也會(huì)對(duì)和其它基因一樣的“發(fā)育暗示”做出反應(yīng)。
研究者的這一發(fā)現(xiàn)開啟了器官形成過程中調(diào)控的一個(gè)全新的研究視角，(通派細(xì)胞庫供應(yīng)：BT-B細(xì)胞)即通過miRNA調(diào)控器官發(fā)育形成。但是許多問題還未知，需要進(jìn)一步進(jìn)行研究。
