細(xì)胞:SK-MEL-5細(xì)胞
中文名稱:人皮膚惡性黑色素瘤細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:MEM+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
SK-MEL-5細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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D型流感病毒的公共安全威脅
流感病毒分為A、B、C三個(gè)類型。研究人員陸續(xù)在豬和牛體內(nèi)分離到新的D型流感病毒。已在北美、歐洲、中國(guó)等多個(gè)國(guó)家和地區(qū)檢測(cè)到D型流感病毒,牛被認(rèn)為是主要宿主。
FTC-133細(xì)胞: 貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件:90% 高糖DMEM、10% FBS
它比C型流感病毒存在更廣譜的細(xì)胞嗜性,能夠感染牛、豬、雪貂和豚鼠并通過接觸傳播感染其他動(dòng)物,有報(bào)道稱在小反芻動(dòng)物如綿羊和山羊等體內(nèi)也存在針對(duì)D型流感病毒的特異性抗體。
FRTL-5細(xì)胞: 貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件:90% L15、10% FBS
研究人員利用結(jié)構(gòu)生物學(xué)手段及功能實(shí)驗(yàn)研究了D型流感病毒表面的糖蛋白HEF,通過糖點(diǎn)陣芯片實(shí)驗(yàn)證明了D型流感病毒能結(jié)合9-O乙酰唾液酸受體及其多種衍生物。
FHC細(xì)胞: 貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件:90% RPMI-1640、10% FBS
隨后,研究人員解析了D型流感病毒HEF蛋白及其與不同受體類似物的復(fù)合物結(jié)構(gòu)。D型流感病毒HEF蛋白受體結(jié)合位點(diǎn)的開放通道使得D型流感病毒能夠容納不同的糖環(huán)構(gòu)象,從而結(jié)合9-O乙酰唾液酸受體及其不同衍生物,為其廣泛的細(xì)胞嗜性提供了結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。
FaDu細(xì)胞: 貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件:90% MEM、10% FBS
科研人員通過組織免疫熒光實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),D型流感病毒HEF能結(jié)合人、豬和牛的氣管纖毛上皮細(xì)胞??紤]到D型流感病毒不僅能夠?qū)е屡:拓i發(fā)病,而且能夠在雪貂和豚鼠中傳播,必須警惕和防范其對(duì)公共安全的威脅。