細(xì)胞:HSC-T6細(xì)胞
中文名稱: 大鼠肝星形細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
HSC-T6細(xì)胞培養(yǎng)基:MEM+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員,以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn),操作前,如果有不明白之處,先咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員,避免不必要的損失;)
研究中將小鼠血液和血液祖細(xì)胞中40種不同類型基因屏蔽部分基因表達(dá)。通過(guò)這種篩選他們確定36轉(zhuǎn)錄因子是只有HSCs表達(dá)的。
BEAS-2B細(xì)胞:貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件:90% RPMI-1640、10% FBS
血細(xì)胞的生產(chǎn)無(wú)一例外地在一個(gè)方向:從干細(xì)胞,到祖細(xì)胞,再到成熟效應(yīng)細(xì)胞,想要從分化的血細(xì)胞中利用我們發(fā)現(xiàn)的只有HSCs的轉(zhuǎn)錄因子逆轉(zhuǎn)這一過(guò)程并獲得HSCs。
BEL-7402細(xì)胞:貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件:90% RPMI-1640、10% FBS
在一系列的小鼠移植實(shí)驗(yàn)中,發(fā)現(xiàn)36個(gè)因子中的6個(gè)即Hlf, Runx1t1, Pbx1, Lmo2, Zfp37 和 Prdm5,另外2個(gè)因子本來(lái)在他們的篩選中沒有發(fā)現(xiàn),即mycn與Meis1 ,是足夠重編程兩種血液祖細(xì)胞(pro/pre B細(xì)胞和常見的骨髓祖細(xì)胞)成為iHSCs。
BEND.3細(xì)胞:貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件:90% DMEM高糖、10% FBS
重編程源細(xì)胞通過(guò)將它們暴露在含有所有8種因子基因和一個(gè)打開因子基因的分子開關(guān)的并在多西環(huán)存在的病毒中。然后將暴露的細(xì)胞移植到受體小鼠并給小鼠用多西環(huán)激活這些基因。
Beta-TC-6細(xì)胞:貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件:80% DMEM、10% FBS
結(jié)果iHSCs能夠產(chǎn)生全部的血細(xì)胞成分在小鼠中,可見他們獲得了分化成所有血液譜系的能力。