細(xì)胞：HPAC細(xì)胞
中文名稱：人胰腺腺泡上皮癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞
HPAC細(xì)胞培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基 血清：10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，避免不必要的損失；)
苜蓿丫紋夜蛾核多角體病毒感染可誘導(dǎo)斜紋夜蛾離體細(xì)胞Sl-zsu-1發(fā)生典型的細(xì)胞凋亡.
通過(guò)細(xì)胞松弛素和NH4Cl的抑制實(shí)驗(yàn), 分別排除病毒粒子結(jié)合細(xì)胞受體蛋白, 和病毒在核內(nèi)體運(yùn)輸過(guò)程啟動(dòng)細(xì)胞凋亡信號(hào)發(fā)生的可能性.
C8161細(xì)胞：貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件：90% RPMI-1640、10% FBS
Caco-2細(xì)胞：貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件：80% MEM、10% FBS
RT-PCR實(shí)驗(yàn)證實(shí), 病毒基因組進(jìn)入了細(xì)胞核, 極早期基因ie-1開(kāi)始了轉(zhuǎn)錄; 而DNA聚合酶抑制劑(芽棲菌素)的存在對(duì)病毒誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡程度與進(jìn)程均沒(méi)有明顯的影響.
這說(shuō)明細(xì)胞凋亡的信號(hào)是先于病毒晚期復(fù)制事件啟動(dòng)的. 單獨(dú)轉(zhuǎn)染AcMNPV極早期基因ie-1可誘導(dǎo)斜紋夜蛾離體細(xì)胞系Sl-zsu-1細(xì)胞發(fā)生部分凋亡, 轉(zhuǎn)染24小時(shí)后出現(xiàn)凋亡小體, 48小時(shí)達(dá)到高峰.
CCD 841 CON細(xì)胞：貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件：90% 高糖DMEM、10% FBS
CCD-18Co細(xì)胞：貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件：90% DMEM高糖、10% FBS
提取轉(zhuǎn)染細(xì)胞的總DNA電泳, 可檢測(cè)到典型的DNA梯形條帶(DNA ladder). AcMNPV 的ie-1基因溫度敏感突變株tsB821在非受納溫度感染細(xì)胞時(shí), 細(xì)胞不發(fā)生凋亡.
這些結(jié)果暗示, 在AcMNPV感染誘導(dǎo)的Sl-zsu-1細(xì)胞凋亡中, ie-1基因是一個(gè)凋亡信號(hào)的直接或間接誘導(dǎo)因子.
