細(xì)胞:HIC細(xì)胞
中文名稱(chēng):人小腸癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
HIC細(xì)胞培養(yǎng)基:MEM+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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真核細(xì)胞中的線(xiàn)粒體被認(rèn)為是和細(xì)菌一樣的內(nèi)共生體,數(shù)百萬(wàn)年前進(jìn)入細(xì)胞系。
一些非常原始的單細(xì)胞生物(包括幾種有重要醫(yī)學(xué)價(jià)值的生物,如Giardia和Trichomonas似乎缺少線(xiàn)粒體,這種“無(wú)線(xiàn)粒體”狀態(tài)被認(rèn)為代表著來(lái)自在生物獲得線(xiàn)粒體之前的一個(gè)時(shí)期的一種遺跡。
786-0細(xì)胞:貼壁細(xì)胞\通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件:90%RPMI1640(含2mM L-glutamine)、10% FBS
A-10細(xì)胞:貼壁細(xì)胞\通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件:90%DMEM高糖、10% FBS
這一共識(shí)受到研究結(jié)果的挑戰(zhàn)。研究結(jié)果表明,這些生物有細(xì)胞器,被稱(chēng)為“氫化酶體”,它們與線(xiàn)粒體有一些相像之處。
但關(guān)于“氫化酶體”是否在演化上與線(xiàn)粒體類(lèi)似、或它們是否代表著一種不同的演化品系有很多不同意見(jiàn)。
A20細(xì)胞:懸浮細(xì)胞\通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件:90%RPMI-1640、10% FBS
A-72細(xì)胞:貼壁細(xì)胞\通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件:90%RPMI-1640、10% FBS
Trichomonas細(xì)胞器的生化性質(zhì)表明,它們與線(xiàn)粒體是不同的。研究人員卻以類(lèi)似的數(shù)據(jù)為依據(jù)認(rèn)為,二者之間關(guān)系密切。這一爭(zhēng)論還在繼續(xù)。