細胞:S18細胞
中文名稱:人鼻咽癌細胞
生長特性:貼壁細胞
S18細胞培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
收到細胞后請盡快更換配套培養(yǎng)基,或自己配置的新鮮培養(yǎng)基(含15%血清),如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時)。
S18細胞傳代:
1):細胞密度約80%時,吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意根據(jù)實際情況,把握消化時間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時;
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處,即可肉眼可見細胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續(xù)消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,吹散。
3):取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中,添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4):注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存。
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EyeWire/Getty ImagesUPR是一種生理反應,從而幫助細胞處理由未折疊蛋白在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(ER)中的積聚所引發(fā)的細胞壓力。
(人U-118 MG細胞 來源:通派細胞庫 人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤)
肌醇所需跨膜蛋白激酶/核酸內(nèi)切酶1α(IRE1α)是一種UPR的引發(fā)劑,并通過一個mRNA剪接事件激活轉(zhuǎn)錄因子X盒結(jié)合蛋白1(XBP1)。Osorio等人發(fā)現(xiàn), IRE1α在DC中——明顯的是CD8α+ cDC——以穩(wěn)態(tài)被組成性激活?!救薝-138 MG細胞 來源:通派細胞庫 人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤】
此外,所有的DC子集表達了疊接的Xbp1 mRNA,在cd8α+ cDCs中具有高的表達水平。明顯的是,cDCs中IRE1α和XBP1的穩(wěn)態(tài)激活發(fā)生在與UPR有關的其他分子缺乏激活的情況下?!救薚84細胞 來源:通派細胞庫 人結(jié)直腸癌肺轉(zhuǎn)移細胞】
Xbp1的DC特定刪除并沒有影響CD8α+ cDCs的分化,但這些細胞具有一個反常的ER結(jié)構(gòu),盡管ER的分泌途徑依然保持功能。這意味著XBP1的一般激活——缺乏ER應激反應的一種常見激活——在這些細胞中是ER體內(nèi)平衡所必須的?!救薖ANC-1細胞 來源:通派細胞庫 人胰腺癌細胞】
與對照組相比,基因編碼整合素β2(CD11c的一個成分)和分子的表達涉及的抗原呈遞(包括TAP-結(jié)合蛋白)在XBP1-缺陷CD8α+ cDCs中更少了,但在XBP1-缺陷CD11b+ cDCs中卻不是這樣?!救薑P-1N細胞 來源:通派細胞庫 人胰腺癌細胞】
與此保持一致的是,XBP1-缺陷CD8α+ cDCs(但不是XBP1-缺陷CD11b+ cDCs)具有較低水平的CD11c表面表達,以及受損的細胞關聯(lián)抗原交叉遞呈。