細胞:U118MG細胞
中文名稱:人膠質(zhì)瘤細胞
生長特性:貼壁細胞
U118MG細胞培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
收到細胞后請盡快更換配套培養(yǎng)基,或自己配置的新鮮培養(yǎng)基(含15%血清),如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時)。
U118MG細胞傳代:
1):細胞密度約80%時,吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意根據(jù)實際情況,把握消化時間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時;
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處,即可肉眼可見細胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續(xù)消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,吹散。
3):取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中,添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4):注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存。
(網(wǎng)絡信息主針對網(wǎng)絡推廣作用,僅供參考,細胞培養(yǎng)請咨詢細胞庫管理員,以細胞庫管理員提供給您的信息為準,操作前,如果有不明白之處,先咨詢細胞庫管理員,避免不必要的損失;)
土壤中的硝酸鹽(植物生長的一種主要營養(yǎng)物)水平可以相差巨大。因此植物需要一個多功能機制來從環(huán)境中獲取硝酸鹽。
(人SK-N-SH細胞 來源:通派細胞庫 人神經(jīng)母細胞瘤細胞)
質(zhì)子偶聯(lián)轉(zhuǎn)運分子NRT1/PTR家族通過肽的攝取同化真核生物和細菌的氮元素。然而,這個家族的大部分成員在植物中已經(jīng)進化到可轉(zhuǎn)運硝態(tài)氮,甚至能夠運送額外的次級代謝物和激素。
(人SK-HEP-1細胞 來源:通派細胞庫 人肝腹水腺癌細胞)
在模型植物擬南芥中,雙親和性轉(zhuǎn)運分子NRT1.1能吸收一系列不同濃度的硝酸鹽,根據(jù)一個關鍵的蘇an酸殘基的磷酸化狀態(tài)從低親和性模式向高親和性模式切換。
(人SK-NEP-1細胞 來源:通派細胞庫 人腎母細胞瘤細胞)
以前的研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)擬南芥NRT1.1作為雙親和性轉(zhuǎn)運分子,它可能會在一個波動很大的一個濃度范圍內(nèi)轉(zhuǎn)運硝酸鹽。NRT1.1的作用方式是通過磷酸化的關鍵殘基——蘇an酸101控制。但目前仍不清楚這一翻譯后修飾開關是如何切換NRT1.1的兩種親和狀態(tài)的。
(人MDA-MB-435S細胞 來源:通派細胞庫 人乳癌細胞)
現(xiàn)在研究人員獲得了未磷酸化的NRT1.1的晶體結構,在面向內(nèi)的構象中發(fā)現(xiàn)了一個出人意外的同型二聚體。利用基于細胞的熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術;
(人M14細胞 來源:通派細胞庫 人黑色素瘤細胞)
研究證實功能性的NRT1.1在細胞膜中二聚化,Thr 101擬磷酸化突變通過將這一二聚體解偶聯(lián),使得這一蛋白轉(zhuǎn)換為單相高親和性轉(zhuǎn)運蛋白。結合底物轉(zhuǎn)運通道分析,研究結果證實這一磷酸化作用控制的二聚化開關使得NRT1.1能夠以兩種不同的親和模式來吸收硝酸鹽。