細胞：IAR20細胞

中文名稱：大鼠肝細胞

生長特性：貼壁

培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

收到細胞后請盡快更換配套培養(yǎng)基，或自己配置的新鮮培養(yǎng)基（含15%血清），如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時）。

IAR20細胞傳代：

1）：細胞密度約80%時，吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞（注意根據(jù)實際情況，把握消化時間）。

2）：鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時；

（可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處，即可肉眼可見細胞層脫落，或吹打后鏡下觀察吹打處，即消化完成，否則繼續(xù)消化）

直接吸掉yi酶，加3~4ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，把細胞層吹落，吹散。

3）：取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中，添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4）：注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存。

（網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細胞培養(yǎng)請咨詢細胞庫管理員，以細胞庫管理員提供給您的信息為準，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細胞庫管理員，避免不必要的損失；）

體細胞可以被重新編程為誘導多能干細胞(Ips)；研究對于理解細胞重編程以及它的功能邁進了重要的一步：發(fā)現(xiàn)了Wnt信號通路在體細胞轉(zhuǎn)化為iPS細胞的關(guān)鍵作用。（人LOVO 來源：通派細胞庫 人結(jié)直腸腺癌細胞）

一般情況下，轉(zhuǎn)錄因子是用來試圖增加或減少細胞重編程過程。發(fā)現(xiàn)通過抑制Wnt信號通路，可以提高細胞重編程過程的效率。

Wnt信號通路是細胞內(nèi)的一系列的生物化學反應(yīng)。例如，在青蛙和蜥蜴中，如果它們受到傷害，這些反應(yīng)在四肢再生發(fā)揮作用。雖然一般情況下，人類和哺乳動物已經(jīng)失去了這種再生能力，但Wnt信號通路在胚胎發(fā)育和細胞融合過程中仍然發(fā)揮很多作用。（人MDA-MB-231 來源：通派細胞庫  人乳癌細胞）

為了解Wnt信號通路在重編程的作用，研究了Wnt信號途徑在體細胞轉(zhuǎn)化成iPS細胞的整個過程的行為，這個通常持續(xù)兩個星期。這是個及其動態(tài)的過程，這條信號通路經(jīng)常搖擺不定，一直都不活躍。

（人MCF-7  來源：通派細胞庫 人乳癌細胞）

有兩個階段，以及它們相互影響，Wnt信號滿足不同的功能。通過在過程開始時抑制Wnt信號通路并且在過程結(jié)束時激活它，可以提高重編程的效率，并獲得更多的多能干細胞。（人KPL-1  來源：通派細胞庫 人乳癌細胞）

為了能夠人為的控制這個途徑，該研究團隊構(gòu)建了一個名為Iwp2的化學分子，它是一個Wnt分泌抑制劑，不會改變細胞，一些其他重組研究使用不同的因素仍未能實現(xiàn)。（人OVCAR-3 來源：通派細胞庫 人乳癌細胞）

Wnt信號通路被激活的準確時間也是至關(guān)重要的。例如如果太早，會導致細胞提前分化成神經(jīng)元或內(nèi)胚層細胞，這些細胞都不能夠進行細胞重編程。

（ONCO-DG-1  來源：通派細胞庫 甲狀腺乳癌細胞）

這對于細胞重編程領(lǐng)域是一個非常重要且創(chuàng)新的進步，因為到現(xiàn)在為止，這個過程的效率非常低。許多研究團隊試圖了解體細胞轉(zhuǎn)化為多能干細胞的機制，以及如何阻止這一過程和怎樣才能讓一小部分細胞最終被重新編程。我們提供了關(guān)于這些過程為什么會發(fā)生的信息；