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[英文名稱]Chicken very low density lipoprotein,VLDL ELISA Kit
[貨號]ZK-C6365
[試劑盒]保存條件、保質(zhì)期2-8℃低溫保存下,6個月的保質(zhì)期。[運輸方式]當?shù)乜蛻艨梢杂蓪iT配送人員免費送貨上門貨快遞,外地客戶當天下單當天免費快遞送貨上門
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實驗所涉及到的儀器如下:
1、酶 標 儀
酶標比色儀介紹:
酶標比色儀簡稱酶標儀,通常指于測讀ELISA結果吸光度的光度計。針對固相載體形式的不同,各有特制的適用于板、珠和小試管的設計。許多試劑公司配套供應酶標儀。酶標儀的主要性能指標有:測讀速度、讀數(shù)的準確性、重復性、精確度和可測范圍、線性等等。優(yōu)良的酶標儀的讀數(shù)一般可精確到0.001,準確性為lusm1%,重復性達0.5%。舉例說,若某孔測得的A值為1.083,則該孔相對于空氣的真實A值應為1.083lusm0.01(1.073~1.093),復測定數(shù)次,其A值均應1.083lusm0.05(1.078~1.088)在之間。酶標儀的可測范圍視各酶標儀的性能而不同。普通的酶標儀在0.000~2.000,新型號的酶標儀上限拓寬達2.900,甚至更高。超出可測上限的A值常以"*"或"over"或其它符號表示。應注意可測范圍與線性范圍的不同,線性范圍常小于可測范圍,比如某一酶標儀的可測范圍為0.000~2.900,而其線性范圍僅0.000~2.000,這在定量ELISA中制作標準曲線時應予注意。
酶標儀不應安置在陽光或強光照射下,操作時室溫宜在15~30℃,使用前先預熱儀器15-30分鐘,測讀結果更穩(wěn)定。
測讀A值時,要選用產(chǎn)物的敏感吸收峰,如OPD用492nm波長。有的酶標儀可用雙波長式測讀,即每孔先后測讀兩次,*次在zui適波長(W1),第二次在不敏感波長(W2),兩次測定間不移動ELISA板的位置。例如OPD用492nm為W1,630nm為W2,zui終測得的A值為兩者之差(W1-W2)。雙波長式測讀可減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。各種酶標儀性能有所不同,使用中應參考對應儀器說明書。
2、洗 板 機
3、離 心 機
4、培 養(yǎng) 箱
試劑盒組成及試劑配制
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
實驗原理
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗該指標抗體、HRP標記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
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