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中有三個(gè)必要的試劑:免疫吸附劑、結(jié)合物和酶的底物等。完整的ELISA試劑盒包含以下各組分:
1、已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);
2、酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);
3、酶的底物;
4、陰性對(duì)照品和陽(yáng)性對(duì)照品(定性測(cè)定中),參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測(cè)定中);
5、結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;
6、洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;
酶反應(yīng)終止液,常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸,其濃度按加量及比色液的zui終體積而異,在板式ELISA中一般采用2mol/L。
標(biāo)本類(lèi)型
ELISA 常見(jiàn)的標(biāo)本一般包括:
● 液體類(lèi)標(biāo)本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
● 培養(yǎng)細(xì)胞
● 組織標(biāo)本
這些標(biāo)本收集的時(shí)間、方法和保存都有一定的要求。
標(biāo)本的保存
一般說(shuō)來(lái),在 5 天內(nèi)測(cè)定的標(biāo)本可放置于 4℃,超過(guò)一周測(cè)定的需低溫凍存。 對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,儲(chǔ)存在 4 ℃ 備用,如有特殊原因需要周期收集標(biāo)本, 將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在 -20 ℃ 或 -70 ℃ 條件下保存。避免反復(fù)凍融。 標(biāo)本 2 -8 ℃ 可保存 48 小時(shí), -20 ℃ 可保存 1 個(gè)月。 -70 度可保存 6 個(gè)月。部分標(biāo) 本也可加入適當(dāng)防腐劑,激素類(lèi)標(biāo)本需添加抑肽酶。
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