?產(chǎn)品名稱：大鼠白介素33(IL33)ELISA試劑盒
?英文名稱：Rat Interleukin 33 (IL33) ELISA Kit
?產(chǎn)品規(guī)格：96T（人份）/48T（人份）（單孔檢測(cè)分別可以檢測(cè)90份樣本，42分樣本，一般都需要留6個(gè)孔做標(biāo)準(zhǔn)曲線）。
?檢測(cè)方法：酶聯(lián)免疫分析ELISA方法
?有效期： 4 個(gè)月(4℃)；8 個(gè)月（-20℃）。 
?保存方法： 2-8℃（頻繁使用時(shí)）; -20℃（長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí)）。 
?品牌：子科生物ZIKER,美國(guó)R&D,美國(guó)immonoway,美國(guó)sciencell,德國(guó)IBL
?質(zhì)量保證：我告訴所有產(chǎn)品均需要經(jīng)過(guò)質(zhì)檢通過(guò)后，才允許出庫(kù)！
?適用范圍：實(shí)驗(yàn)結(jié)果僅供科研參考，不推薦用于臨床診斷結(jié)果。
?ELISA常用的方法：雙抗體夾心法、間接法、競(jìng)爭(zhēng)法以及BAS-ELISA等，子科生物ELISA產(chǎn)品主要用雙抗體夾心法。

大鼠白介素33(IL33)ELISA試劑盒操作步驟
1、 取出試劑盒，于室溫(20-25℃)放置15-30分鐘。實(shí)驗(yàn)過(guò)程應(yīng)在室溫(20-25℃)內(nèi)進(jìn)行。
2、 取出酶標(biāo)板，按照標(biāo)準(zhǔn)品的次序分別加入50μl的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中。
3、空白微孔中加入50μl的樣品，空白對(duì)照加入50μl的蒸餾水；
4、 在樣品孔中加入10μl的生物素；(不含空白對(duì)照孔,切忌：生物素只加樣品孔！)
5、在各孔中加入100μl的酶標(biāo)記溶液；(不含空白對(duì)照孔)
6、將酶標(biāo)板用封口膠密封后，37℃孵育反應(yīng) 1小時(shí)；(在孵育箱中保持穩(wěn)定的溫度與濕度)
7、 充分清洗酶標(biāo)板3-5次，保持各孔有充足的水壓；(濃縮洗滌液以1：100的比例與蒸餾水稀釋)
8、酶標(biāo)板洗滌后用吸水紙*拍干；
9、各孔加入顯色劑A、B液各50μl；(不含空白對(duì)照孔)
10、20-25℃下避光反應(yīng)15分鐘；
11、各孔加入50μl終止液，終止反應(yīng)；

結(jié)果判斷
1、30分鐘內(nèi)在波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值；
2、以O(shè)D值為縱坐標(biāo)，以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo)，繪制曲線圖；
3、根據(jù)樣品的OD值查找對(duì)應(yīng)的濃度范圍；

標(biāo)本要求： 
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

大鼠白介素33(IL33)ELISA試劑盒的基本原理
就是將抗原抗體固定到特定的載體上進(jìn)行反應(yīng)，并通過(guò)酶催化底物發(fā)生化學(xué)變化將抗原抗體反應(yīng)通過(guò)顏色的形式顯現(xiàn)出來(lái)。
（1）將抗原抗體反應(yīng)固相化：即試驗(yàn)中的包被環(huán)節(jié)，使抗原或抗體吸附于固相載體表面。其機(jī)制可能是聚苯乙烯表面間的疏水基團(tuán)可以無(wú)選擇性地吸附蛋白分子。此物理性吸附不破壞蛋白分子結(jié)構(gòu)，保持其生物學(xué)特性和免疫學(xué)活性；
（2）封閉：固相吸附蛋白是非特異性的，在包被目的免疫蛋白后，未吸附蛋白的固相表面仍然有吸附其它蛋白的能力，為了保障抗原抗體反應(yīng)的特異性，因此，包被剩余的固相表面應(yīng)該用抗原抗體反應(yīng)無(wú)關(guān)蛋白封閉。一般認(rèn)為牛血清白蛋白是zui為理想的封閉劑，也可用脫脂奶粉、明膠、牛血清替代。
（3）抗原抗體反應(yīng)：抗原或抗體在適當(dāng)?shù)慕橘|(zhì)下可進(jìn)行特異的抗原抗體反應(yīng)。 （4）酶反應(yīng)：酶可以通過(guò)共價(jià)鍵與抗原或抗體連接形成結(jié)合物，當(dāng)抗原抗體反應(yīng)的時(shí)候，被檢測(cè)靶目標(biāo)中也結(jié)合了酶分子。
（5）ELISA試劑盒底物反應(yīng)：結(jié)合在抗原抗體中的酶分子，可以促使底物發(fā)生顏色反應(yīng)，檢測(cè)人員可以裸眼觀察，可以通過(guò)顏色來(lái)判定是否有免疫反應(yīng)的存在，通過(guò)顏色的深淺判斷標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的含量，也可借用酶標(biāo)儀在適當(dāng)?shù)牟ㄩL(zhǎng)讀取吸光度值。

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