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大鼠兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒●品牌:子科生物ZIKER,美國R&D,美國immonoway,美國sciencell,德國IBL
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深圳子科生物提供的ELISA試劑盒產(chǎn)品經(jīng)過實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員多年的研發(fā)經(jīng)驗(yàn)積累可以檢測多種標(biāo)本,參數(shù)指標(biāo)齊全,并可提供準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)分析,我公司并代理各大進(jìn)口原裝試劑盒,提供品牌有:美國RD、RB、 TSZ、Cloud-clone corp、MP、 Sciencell、Immonoway、ABI,IBL等等,并提供分子生物學(xué)檢測試劑盒、免疫學(xué)檢測試劑盒、金標(biāo)法檢測試劑盒、各品牌*抗體抗原、標(biāo)準(zhǔn)對照品、細(xì)胞菌株、生物培養(yǎng)基、生化試劑、實(shí)驗(yàn)耗材等等多門類上萬種科研產(chǎn)品,歡迎您!
大鼠兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)測定具體步驟:
1.確定本次檢測所需的已包被抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目,并增加 1 孔作為 TMB 空白顯色孔。 總數(shù)=樣品數(shù)+9;做雙份檢測時×2。其余重包裝好放如冰箱中。
2.將標(biāo)準(zhǔn)品各 0.1ml 依次加入一排 7 孔中,1 孔只加樣品稀釋液的作為零孔。對于血清、體液、 組織勻漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清,直接加已用樣品稀釋液稀釋的樣品 100μ ι 。
3.酶標(biāo)板加上蓋,37℃反應(yīng) 90 分鐘。
4.反應(yīng)后用自動洗板機(jī)吸去酶標(biāo)板內(nèi)的液體;或甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體,再對著吸水紙拍幾下。 不洗。
5.將準(zhǔn)備好的生物素抗體工作液按每孔 0.1ml 依次加入。(TMB 空白顯色孔除 外)。37℃反應(yīng) 60 分鐘。
6. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 3 次,每次浸泡 1 分鐘左右。
7.將準(zhǔn)備好的 ABC 工作液按每孔 0.1ml 依次加入(TMB 空白顯色孔除外)。37℃反應(yīng) 30 分鐘。
8. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 5 次,每次浸泡 1-2 分鐘左右。
9.按每孔 90μ ι 依次加入已在 37℃平衡 30 分鐘的 TMB 顯色液,37℃避光反應(yīng) 20-25 分鐘 (注意:顯色時間供參考,因用戶實(shí)驗(yàn)室條件差異,顯色時間會有所不同。此時肉眼可 見標(biāo)準(zhǔn)品的前 3-4 孔有明顯的梯度藍(lán)色,后 3-4 孔差別不明顯)。
10.按每孔 0.1ml 依次加入 TMB 終止液,此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。
11.用酶標(biāo)儀在 450nm 測定 OD值。
注意:客戶收到我公司產(chǎn)品請*時間確認(rèn)試劑盒是否有破損,酶標(biāo)板是否封閉,使用前 TMB顯色液應(yīng)為無色透明溶液,若發(fā)現(xiàn)顏色異常,或者其他問題請及時與我司售后人員進(jìn)行,我們會*次安排進(jìn)行退換。
封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染,底物請避光保存。使用之后所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,以免造成污染!
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