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大鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒

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更新時(shí)間:2020-05-12 16:51:42瀏覽次數(shù):182次

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大鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒?英文名稱:Rat 17-Hydroxycorticosteroids,17-OHCS ELISA Kit 
?產(chǎn)品規(guī)格:96T(人份)/48T(人份)(單孔檢測分別可以檢測90份樣本,42分樣本,一般都需要留6個(gè)孔做標(biāo)準(zhǔn)曲線)。
?檢測方法:酶聯(lián)免疫分析ELISA方法
?有效期: 4 個(gè)月(4℃);8 個(gè)月(-20℃)。 
?保存方法: 2-8℃(頻繁使用時(shí)); -20℃(長時(shí)間不用時(shí))。 
?品牌:子科生物ZIKER,美國R&D,美國immonoway,美國sciencell,德國IBL
?質(zhì)量保證:我告訴所有產(chǎn)品均需要經(jīng)過質(zhì)檢通過后,才允許出庫!
?適用范圍:實(shí)驗(yàn)結(jié)果僅供科研參考,不推薦用于臨床診斷結(jié)果。
?ELISA常用的方法:雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等,子科生物ELISA產(chǎn)品主要用雙抗體夾心法。

大鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)測定具體步驟:
1.確定本次檢測所需的已包被抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目,并增加 1 孔作為 TMB 空白顯色孔。 總數(shù)=樣品數(shù)+9;做雙份檢測時(shí)×2。其余重包裝好放如冰箱中。 
2.將標(biāo)準(zhǔn)品各 0.1ml 依次加入一排 7 孔中,1 孔只加樣品稀釋液的作為零孔。對于血清、體液、 組織勻漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清,直接加已用樣品稀釋液稀釋的樣品 100μ ι 。 
3.酶標(biāo)板加上蓋,37℃反應(yīng) 90 分鐘。 
4.反應(yīng)后用自動洗板機(jī)吸去酶標(biāo)板內(nèi)的液體;或甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體,再對著吸水紙拍幾下。 不洗。 
5.將準(zhǔn)備好的生物素抗體工作液按每孔 0.1ml 依次加入。(TMB 空白顯色孔除 外)。37℃反應(yīng) 60 分鐘。 
6. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 3 次,每次浸泡 1 分鐘左右。 
7.將準(zhǔn)備好的 ABC 工作液按每孔 0.1ml 依次加入(TMB 空白顯色孔除外)。37℃反應(yīng) 30 分鐘。 
8. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 5 次,每次浸泡 1-2 分鐘左右。 
9.按每孔 90μ ι 依次加入已在 37℃平衡 30 分鐘的 TMB 顯色液,37℃避光反應(yīng) 20-25 分鐘 (注意:顯色時(shí)間供參考,因用戶實(shí)驗(yàn)室條件差異,顯色時(shí)間會有所不同。此時(shí)肉眼可 見標(biāo)準(zhǔn)品的前 3-4 孔有明顯的梯度藍(lán)色,后 3-4 孔差別不明顯)。 
10.按每孔 0.1ml 依次加入 TMB 終止液,此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。 
11.用酶標(biāo)儀在 450nm 測定 OD值。

ELISA試劑盒的基本原理
就是將抗原抗體固定到特定的載體上進(jìn)行反應(yīng),并通過酶催化底物發(fā)生化學(xué)變化將抗原抗體反應(yīng)通過顏色的形式顯現(xiàn)出來。
(1)將抗原抗體反應(yīng)固相化:即試驗(yàn)中的包被環(huán)節(jié),使抗原或抗體吸附于固相載體表面。其機(jī)制可能是聚苯乙烯表面間的疏水基團(tuán)可以無選擇性地吸附蛋白分子。此物理性吸附不破壞蛋白分子結(jié)構(gòu),保持其生物學(xué)特性和免疫學(xué)活性;
(2)封閉:固相吸附蛋白是非特異性的,在包被目的免疫蛋白后,未吸附蛋白的固相表面仍然有吸附其它蛋白的能力,為了保障抗原抗體反應(yīng)的特異性,因此,包被剩余的固相表面應(yīng)該用抗原抗體反應(yīng)無關(guān)蛋白封閉。一般認(rèn)為牛血清白蛋白是zui為理想的封閉劑,也可用脫脂奶粉、明膠、牛血清替代。
(3)抗原抗體反應(yīng):抗原或抗體在適當(dāng)?shù)慕橘|(zhì)下可進(jìn)行特異的抗原抗體反應(yīng)。 (4)酶反應(yīng):酶可以通過共價(jià)鍵與抗原或抗體連接形成結(jié)合物,當(dāng)抗原抗體反應(yīng)的時(shí)候,被檢測靶目標(biāo)中也結(jié)合了酶分子。
(5)ELISA試劑盒底物反應(yīng):結(jié)合在抗原抗體中的酶分子,可以促使底物發(fā)生顏色反應(yīng),檢測人員可以裸眼觀察,可以通過顏色來判定是否有免疫反應(yīng)的存在,通過顏色的深淺判斷標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的含量,也可借用酶標(biāo)儀在適當(dāng)?shù)牟ㄩL讀取吸光度值。

其他相關(guān)產(chǎn)品如下:

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ZKP238    Anti-TNF-α /RBITC  紅色熒光素標(biāo)記腫瘤壞死因子抗體
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ZKP244    Anti-VEGF/RBITC  羅丹明標(biāo)記VEGF抗體IgG
ZKP245    Anti-VEGFR2(VEGF-R2)Flk1/FITC  熒光素標(biāo)記血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體IgG
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ZKP247    Anti-GAD-65/FITC  熒光素標(biāo)記谷氨酸脫羧酶-65抗體IgG
ZKP248    Anti-Anopheles stephensi protein 1/FITC  熒光素標(biāo)記硫酯包含蛋白-1抗體IgG
ZKP249    Anti-β-HCG/Biotin  生物素化小鼠抗人β亞基人絨毛膜促性腺激素單抗
ZKP250    Anti-α -HCG/Biotin  生物素化小鼠抗人α亞基人絨毛膜促性腺激素單抗
ZKP251    Anti-TGF-β1/FITC  熒光素標(biāo)記TGF-β1抗體IgG(標(biāo)記抗體)

 

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