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大鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒●品牌:子科生物ZIKER,美國R&D,美國immonoway,美國sciencell,德國IBL
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大鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測定相關(guān)血清、血漿或其它相關(guān)液體中的含量/活性。
●標(biāo)本的采集及保存:
1.血清:標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
●操作步驟
各試劑在使用前平衡至室溫。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。除空白孔外,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)溶液或待測樣品100ul,注意不要有氣泡,輕輕混勻,酶標(biāo)板加上蓋,37℃反應(yīng)120分鐘。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。
3. 每孔加檢測溶液A工作液 100ul,37℃,60分鐘。洗板3次,350ul/每孔,甩干。
4. 每孔加檢測溶液B工作液 100ul,37℃,60分鐘,洗板5次,甩干。
5. 依序每孔加底物溶液90ul,37℃避光顯色30分鐘(此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯)。
6. 依序每孔加終止溶液50ul,終止反應(yīng)(此時蘭色立轉(zhuǎn)黃色)。用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。
●注:1.每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2NH2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零。
2.為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)。
●洗板方法:
手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。
自動洗板:如果有自動洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
●特異性:本試劑盒可同時檢測改指標(biāo),且與其它相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
●計算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)(對數(shù)坐標(biāo)),OD值為縱坐標(biāo)(普通坐標(biāo)),在半對數(shù)坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
●注意事項:
1.洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。
2.一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
3.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。
4.如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)。
5.在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液工作液時,請以相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。
6.底物請避光保存。
●檢測范圍:請咨詢在線客服或。
●說明
1.試劑盒保存:-20℃(較長時間不用時);2-8℃(頻繁使用時)。
2.有效期:6個月
3.濃洗滌液會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
4.剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會對實驗結(jié)果造成任何影響。
5.中、英文說明書可能會有不*之處,請以英文說明書為準(zhǔn)。
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